地中海块菌Picoa lefebvrei的麦角甾烷型甾体化合物分离及其抗氧化与抗肿瘤活性研究

本研究针对食用块菌活性成分研究不足的问题，通过系统分离鉴定Picoa lefebvrei中的8种化合物（包括brassicasterol等甾体衍生物），发现化合物4（l-uridine）在DPPH/ABTS/CUPRAC抗氧化实验中IC50 值达70.55-112.08 μg/mL，化合物8对H1299肺癌细胞（IC50 :33.94 μg/mL）和化合物1对MCF-7乳腺癌细胞（IC50 :24.72 μg/mL）展现显著细胞毒性，为开发天然抗癌剂和神经退行性疾病治疗药物提供了新资源。

　　

在广袤的地中海沿岸干旱地区，一种名为Picoa lefebvrei的地下块菌与岩蔷薇属植物形成奇妙的共生关系。这种被当地人视为美食的珍馐，其科学价值正逐渐揭开面纱。尽管块菌以独特风味闻名，但关于其药用成分的研究却长期滞后。尤其令人困惑的是，这类真菌富含的麦角甾烷型(ergostane)甾体化合物——与真菌细胞膜关键成分麦角固醇结构相似的活性物质，虽在抗癌、抗炎等领域展现潜力，却鲜有系统研究。更棘手的是，阿尔茨海默症等神经退行性疾病急需新型胆碱酯酶抑制剂，而天然来源的活性分子筛选正是解决这一难题的重要途径。

针对这些科学问题，土耳其穆拉省锡提科曼大学的研究团队对P. lefebvrei展开了开创性研究。他们采用多步色谱分离技术，从氯仿和甲醇提取物中成功获得8种化合物，包括首次从该物种报道的brassicasteryl linoleate（7）等甾体衍生物。通过核磁共振（NMR）、质谱（MS）等先进技术解析结构后，团队系统评估了这些化合物在抗氧化、抗肿瘤及酶抑制等方面的生物活性。相关成果发表在《Steroids》期刊，为天然药物开发提供了重要线索。

关键技术方法包括：采集自土耳其的野生块菌样本经鉴定后，依次用正己烷、氯仿、丙酮、甲醇进行梯度提取；采用硅胶柱色谱、半制备HPLC等技术分离纯化化合物；通过IR、1D/2D-NMR和MS进行结构鉴定；采用DPPH、ABTS、CUPRAC三种方法评估抗氧化活性；以MCF-7、H1299和L929细胞系进行MTT法细胞毒性测试；采用Ellman法测定乙酰胆碱酯酶（AChE）和丁酰胆碱酯酶（BChE）抑制率。

化合物鉴定结果
研究团队成功分离出8种已知化合物，包括甾醇类（1、2、7、8）、核苷类（3、4）和糖类（5、6）。其中化合物8（5α,6α-epoxy ergosta-7,22-dien-3β-ol）作为麦角甾烷型环氧衍生物，其结构通过HMBC谱中H-6与C-5、C-7的相关信号得以确认。这些甾体化合物的集中出现，证实P. lefebvrei是麦角甾烷型化合物的天然储库。

生物活性研究
在抗氧化方面，核苷类化合物4（l-uridine）表现突出，其对DPPH自由基的IC₅₀
值为92.61 μg/mL，优于阳性对照BHA。更引人注目的是其抗肿瘤活性——甾体化合物8对非小细胞肺癌H1299的细胞毒性（IC₅₀
:33.94 μg/mL）接近临床药物水平，而化合物1（brassicasterol）对乳腺癌MCF-7细胞的选择性杀伤作用（IC₅₀
:24.72 μg/mL）提示其可能通过雌激素受体通路发挥作用。在神经保护方面，化合物3（uracil）和8对AChE/BChE的双重抑制（44.59%-54.97%）显示其治疗阿尔茨海默症的潜力。

这项研究首次全面揭示了P. lefebvrei的药用价值。其重要意义在于：①发现该块菌是麦角甾烷型甾体的优质来源，为抗癌药物研发提供新思路；②化合物8独特的环氧结构与其显著细胞毒性的关联，为结构修饰指明方向；③核苷与甾体的协同抗氧化效应，为功能性食品开发奠定基础。正如通讯作者Mehmet Emin Duru强调的，这项成果不仅填补了沙漠块菌化学研究的空白，更揭示了"地下黄金"在生物医药领域的巨大潜力。未来研究应着重解析化合物1和8的具体作用靶点，并考察其体内药效学特征，以推动这些天然分子向临床转化。