VISTA通过调控ACOD1/衣康酸代谢缓解脑缺血-再灌注损伤后小胶质细胞介导的神经炎症

这篇研究揭示了免疫检查点分子VISTA（VSIR）通过上调ACOD1（IRG1）表达促进衣康酸（ITA）生成，调控三羧酸（TCA）循环代谢，进而抑制IκBα/NF-κB通路，减轻脑缺血-再灌注损伤（CIRI）中的小胶质细胞炎症反应。研究结合tMCAO小鼠模型和OGD/R细胞模型，证实VISTA可缩小梗死体积、改善神经功能缺损，为缺血性卒中治疗提供新靶点。

　　

引言

急性缺血性卒中（AIS）是全球致残致死的主因，再灌注治疗虽可恢复血流，却会引发脑缺血-再灌注损伤（CIRI）。小胶质细胞作为中枢固有免疫细胞，在CIRI中被激活并释放促炎因子，加剧神经损伤。VISTA（V-type immunoglobulin domain–containing suppressor of T cell activation）是新型抑制性免疫检查点，既往研究显示其在脓毒症脑病中通过TRIM28介导的HK2泛素化负调控小胶质细胞糖酵解。然而，VISTA在CIRI中的作用机制尚未阐明。

材料与方法

研究通过GSE77986数据库筛选出8个差异表达的免疫检查点基因（DE-ICGs），其中VSIR（编码VISTA）表达量最高且在tMCAO模型中显著下调。实验采用Cx₃cr1^Cre小鼠构建tMCAO模型，通过脑室注射AAVMG1.2-VSIR干预VISTA表达；体外采用BV2小胶质细胞系建立OGD/R模型，转染VSIR过表达质粒。通过Longa评分、TTC染色评估神经功能，WB和qRT-PCR检测炎症因子，RNA测序分析代谢通路，ELISA测定TCA循环代谢物。

结果

1. VISTA在CIRI中动态变化：免疫荧光显示VISTA主要表达于小胶质细胞（Iba1⁺），在梗死周边区表达降低，最低点出现在再灌注后3天。
2. 神经保护作用：VISTA过表达使梗死体积减少42.3%，Longa评分改善2.1倍（p<0.01），H&E和Nissl染色显示神经元坏死减少。
3. 抗炎机制：VISTA降低促炎因子IL-6、TNFα、IL-1β（分别下降58%、47%、63%），增加抗炎因子IL-10（上升2.8倍），并抑制小胶质细胞增殖（Edu⁺细胞减少67%）。
4. 代谢重编程：RNA-seq发现VISTA上调ACOD1表达，促进ITA生成（升高3.1倍），同时降低柠檬酸和异柠檬酸水平（p<0.001）。
5. 通路验证：ACOD1敲除后，VISTA对IκBα/NF-κB通路的抑制作用消失，磷酸化p65水平回升至对照组的82%。

讨论

研究首次揭示VISTA-ACOD1-ITA轴在CIRI中的关键作用：

• 代谢调控：VISTA通过ACOD1将TCA循环代谢流向ITA，抑制糖酵解，这与既往发现的VISTA负调控HK2一致。
• 炎症抑制：ITA通过阻断IκBα磷酸化（下降54%）抑制NF-κB核转位，减少促炎因子释放。
• 临床意义：VISTA激动剂或ITA衍生物（如4-辛基ITA）可能成为卒中辅助治疗策略。

局限与展望

研究未明确VISTA在中枢的配体，且ACOD1在再灌注后期的动态变化机制需进一步探索。未来可开发靶向VISTA-ACOD1通路的纳米递药系统，结合免疫检查点疗法实现多靶点干预。