基于体内序贯代谢与网络药理学的苗药赶黄草治疗胆汁淤积性肝损伤质量标志物筛选研究

本研究针对苗药赶黄草(Penthorum chinense Pursh, PCP)治疗胆汁淤积性肝损伤(CLI)缺乏明确质量标志物(Q-marker)的问题，创新性整合体内序贯代谢UPLC/MS、网络药理学和细胞实验技术，鉴定出18种原型成分和123种代谢物，筛选出pinocembrin等6个核心Q-markers，其与TNF、AKT1等靶点结合能<-6.5 kcal/mol，细胞实验验证其抗CLI活性，为PCP质量控制提供科学依据。

　　

在传统中药现代化进程中，如何建立科学的质量控制体系始终是制约其国际化发展的关键瓶颈。苗药赶黄草(Penthorum chinense Pursh, PCP)作为治疗肝病的特色民族药，虽在临床上显示出抗肝炎病毒、抗肝纤维化等多重功效，但其治疗胆汁淤积性肝损伤(Cholestatic Liver Injury, CLI)的活性成分群和质量控制标准尚未明确。这种"成分-效应"关联的模糊性，直接影响了PCP制剂的质量均一性和临床疗效稳定性。

针对这一科学问题，山东中医药大学的研究团队在《Journal of Chromatography B》发表了一项突破性研究。该团队创新性地构建了"体内代谢追踪-计算预测-实验验证"三位一体的研究范式，首次系统阐明了PCP在体内的代谢命运，并锁定了6个具有质量控制价值的核心成分。这项研究不仅为PCP的质量标准提升提供了直接依据，更为复杂中药体系的质量标志物研究提供了方法论参考。

研究采用四大关键技术：1) 大鼠体内序贯代谢模型（涵盖肠道菌群、肝代谢和全身暴露分析）；2) UPLC-MS/MS高分辨质谱技术；3) 基于网络药理学的"成分-靶点-通路"多维网络构建；4) L02肝细胞系实验验证。通过整合这些技术，实现了从代谢组学到药理机制的全链条解析。

序贯和综合代谢
通过比较肠道、肝脏和全身代谢样本，鉴定出18种原型成分(P1-P16)和123种代谢物(M1-M57)，其中黄酮类成分主要经历羟基化、还原、乙酰化和葡萄糖醛酸化等代谢途径。特别发现5种通过代谢物逆向追踪推断的原型成分，拓展了成分认知边界。

网络药理学分析
筛选出pinocembrin、apigenin等6个潜在Q-markers，其核心靶点TNF、AKT1和ESR1与炎症反应、细胞凋亡等CLI关键通路密切关联。分子对接显示所有候选成分与靶点结合能均<-6.5 kcal/mol，其中pinocembrin-7-O-β-D-glucoside与AKT1结合能达-9.8 kcal/mol，提示强相互作用。

细胞实验验证
L02细胞实验证实6个Q-markers均能显著改善CLI模型细胞活力，其中alpinetin和5-methoxy pinocembroside表现出最强的抗氧化应激活性，这与网络预测结果高度一致。

含量测定
HPLC-DAD分析12批甘肃颗粒显示6个Q-markers含量稳定，相对标准偏差<5%，证实其作为质量控制的可行性。

该研究通过多学科交叉策略，首次建立了PCP治疗CLI的质量标志物筛选体系。其创新性体现在：1) 提出"代谢暴露-活性关联"的双维度筛选标准；2) 发现5-methoxy pinocembroside等新型活性成分；3) 验证TNF-AKT1-ESR1网络是PCP抗CLI的核心机制靶标。这些发现不仅为PCP制剂的质量标准升级提供了直接依据，其建立的"序贯代谢+逆向追踪"技术路线，对解决其他中药复杂体系的质量控制难题具有重要借鉴意义。研究团队特别指出，未来需开展更多临床样本验证，以推动这些Q-markers从实验室研究向药典标准的转化。