班巴拉花生致敏蛋白标记肽段的鉴定与特性分析：抗酶解及热加工稳定性的新发现

本研究针对班巴拉花生中11 kDa和13 kDa抗消化致敏蛋白，采用LC-HR-MS/MS（液相色谱-高分辨质谱）结合DNAStar软件鉴定出5种种子贮藏蛋白相关肽段，其中3种可作为稳定标记肽，兼具抗胰酶消化和耐热特性，并含B细胞表位，为过敏诊断试剂盒开发和免疫治疗疫苗设计提供新靶点。

　　

在全球食物过敏发病率持续攀升的背景下，班巴拉花生作为新兴植物蛋白来源，其致敏性成为食品安全领域的重要课题。既往研究发现，班巴拉花生中109 kDa的致敏蛋白经胃肠消化后，会分解为11 kDa和13 kDa的稳定片段，这些片段仍能引发人体IgE反应。这一现象提示，传统过敏原检测方法可能低估了加工食品中残留致敏肽段的危险性。为此，印度尼西亚研究人员开展了一项突破性研究，成果发表于《Journal of Food Composition and Analysis》。

研究团队采用LC-HR-MS/MS（液相色谱-高分辨质谱联用技术）结合Q-orbitrap系统，对经胰酶消化的蛋白片段进行高精度分析，并通过DNAStar Lasergene软件预测B细胞表位。样本来自印度尼西亚西爪哇省Jampang地区特定规格（1-2 cm）的紫黑色班巴拉花生，经脱脂、提取后获得蛋白样品。

蛋白质提取与鉴定
通过Tris-HCl缓冲液提取的蛋白质经电泳分离后，针对性选取11 kDa和13 kDa条带进行质谱分析。结果显示，这两个条带分别包含3种和5种蛋白质，其中种子贮藏蛋白（seed storage protein）的Sequest HT评分最高，被确认为主要致敏成分。

标记肽段特性分析
在鉴定的5种肽段中，3种满足标记肽标准：

1. 抗消化性：耐受胃蛋白酶和胰酶水解
2. 热稳定性：在挤压加工（extrusion）面粉中仍可检出
3. 免疫原性：4/5肽段含预测的B细胞表位，可能介导IgE反应

结论与意义
该研究首次明确班巴拉花生的核心致敏标记肽段，其双重稳定性（酶解/热加工）解释了加工食品残留致敏性的分子基础。发现的3种标记肽为开发快速检测试剂盒提供特异性靶标，而预测的表位信息为过敏疫苗设计奠定基础。研究创新性结合高分辨质谱与生物信息学分析，为其他豆科作物致敏性研究提供了方法论范式。

值得注意的是，这些肽段属于种子贮藏蛋白家族，该家族蛋白在多种作物中具有交叉致敏风险。因此，研究成果不仅对班巴拉花生食品安全评估至关重要，更为相关作物过敏原数据库的完善提供了关键数据。研究团队特别指出，未来需通过体内实验验证表位的实际致敏性，以推进临床应用。

（注：原文中技术细节如"Sequest HT评分"、"Q-orbitrap系统"等专业术语均按原文格式保留，未标注的英文术语为研究领域通用表述）