基于胆碱氯化物天然低共熔溶剂的鼠尾草多酚绿色高效提取：植物化学筛选与生物活性研究

本研究针对传统有机溶剂提取植物多酚的毒性问题，创新性采用胆碱氯化物-尿素(ChCl:U)和胆碱氯化物-抗坏血酸(ChCl:AA)两种天然低共熔溶剂(NADES)，系统评估其对鼠尾草多酚的提取效率及生物活性。结果表明ChCl:U在90℃/90分钟条件下提取效率显著优于70%乙醇和水，而ChCl:AA提取物在DPPH•/ABTS•+自由基清除和抗变异链球菌方面表现突出，为绿色溶剂开发提供重要依据。

　　

在传统植物活性成分提取领域，有机溶剂因其高毒性始终是难以回避的环保隐患。随着绿色化学理念的兴起，天然低共熔溶剂(Natural Deep Eutectic Solvents, NADES)作为由氢键受体(HBA)和氢键供体(HBD)构成的新型溶剂体系，凭借其可降解、低毒的特性成为研究热点。鼠尾草(Salvia officinalis L.)作为富含多酚的药用植物，其提取物的抗氧化、抗菌等生物活性已被广泛证实，但现有提取方法仍严重依赖乙醇等有机溶剂。

针对这一矛盾，来自塞尔维亚的研究团队在《Journal of Molecular Liquids》发表研究，创新性地采用胆碱氯化物(ChCl)分别与尿素(U)、抗坏血酸(AA)构建两种NADES体系，通过系统比较其与常规溶剂(70%乙醇和水)的提取效率及生物活性差异。研究采用傅里叶变换红外光谱(FTIR)验证溶剂结构稳定性，通过体外实验评估提取物对MRC-5人成纤维细胞的细胞毒性，采用DPPH^•和ABTS^•+自由基清除实验测定抗氧化能力，并通过微稀释法测试对致龋菌株变异链球菌(Streptococcus mutans)和血链球菌(Streptococcus sanguinis)的抑制效果。

材料与方法
研究选用ChCl:U和ChCl:AA两种NADES体系，通过加热搅拌法制备后加水30%改善流动性。以70%乙醇和水为对照，在不同温度(50℃)和时间(90分钟)条件下提取鼠尾草多酚，采用紫外分光光度法测定总酚含量，HPLC检测特定多酚(槲皮素、迷迭香酸等)的提取效率。

合成与表征
FTIR光谱证实NADES成功合成，ChCl:U在3216 cm^?1处出现特征性O-H振动峰，ChCl:AA在1750 cm^?1保留抗坏血酸的羰基峰，表明水添加未破坏溶剂结构。

提取效率
ChCl:U在90℃/90分钟条件下提取总酚量最高，较70%乙醇提升约40%，尤其对非黄酮类物质(如迷迭香酸)提取优势显著。ChCl:AA因酸性环境导致部分酚类降解，提取效率次之。

生物活性

1. 抗氧化性：ChCl:AA提取物在DPPH^•(IC₅₀ 12.5 μg/mL)和ABTS^•+(TEAC值3.8 mM)实验中表现最优，归因于抗坏血酸的协同作用。
2. 细胞毒性：ChCl:U提取物对MRC-5细胞的CC₅₀值>500 μg/mL，显著优于ChCl:AA(CC₅₀ 320 μg/mL)，证实尿素体系的生物相容性优势。
3. 抗菌活性：两种NADES对致龋菌的最小抑菌浓度(MIC)均为15.6 μg/mL，较70%乙醇提取物降低2个稀释度，其中ChCl:AA因酸性环境对细菌膜破坏作用更强。

结论与意义
该研究证实ChCl:U NADES在保持低细胞毒性的同时，能高效提取鼠尾草多酚；而ChCl:AA提取物凭借其酸性特性在抗氧化、抗菌方面独具优势。这一发现不仅为植物活性成分的绿色提取提供新思路，其针对口腔致病菌的特异性抑制效果，更为开发天然源口腔护理产品奠定理论基础。研究团队特别指出，NADES的可设计性允许通过调整HBD组分定向优化提取性能，这种"溶剂工程"策略将推动绿色提取技术的精准化发展。

（注：全文数据均来自原文所述实验，作者包括Marijana Jani?、Nikola Zdol?ek等，研究受塞尔维亚科技创新部资助，项目编号451-03-136/2025-03/200017）