EGb761通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制海马神经元凋亡与自噬改善血管性痴呆的机制研究

本研究针对血管性痴呆(VD)缺乏有效治疗靶点的临床难题，探索了银杏叶提取物EGb761通过激活Wnt/β-catenin信号通路，抑制海马神经元凋亡(cleaved caspase-3)和自噬(LC3-II/IRGM)，显著改善VD大鼠认知功能的创新机制，为开发神经保护药物提供了新策略。

　　

血管性痴呆(VD)作为全球第二大痴呆类型，正随着人口老龄化加剧成为重大公共卫生问题。这种由脑血管病变导致的认知障碍综合征，目前临床治疗仅能缓解症状，无法逆转神经损伤。更棘手的是，慢性脑低灌注引发的海马神经元凋亡与自噬过度激活，被认为是VD认知恶化的关键推手。面对这一困境，河北医科大学团队将目光投向了传统中药银杏叶的标准化提取物EGb761——这种具有多靶点神经保护潜力的天然化合物，能否通过调控关键信号通路挽救濒死的神经元？

为解答这个问题，研究团队在《European Journal of Medical Research》发表了开创性成果。他们采用双侧颈总动脉结扎(2VO)建立VD大鼠模型，通过Morris水迷宫评估认知功能，结合HE染色、透射电镜观察神经元形态，并运用免疫组化、Western blot等技术检测Wnt/β-catenin通路关键蛋白(β-catenin/P53)及自噬标志物(LC3-II/SQSTM1)的表达变化。为验证机制特异性，还引入通路抑制剂DKK1和氧化应激诱导剂H₂O₂进行反向验证。

EGb761显著改善VD大鼠行为学表现
水迷宫实验显示，模型组逃避潜伏期较假手术组延长2倍，而EGb761高剂量组(50 mg/kg)治疗4周后，潜伏期缩短47%。空间探索测试中，EGb761组在目标象限停留时间占比提升至38%，接近正常水平。游泳轨迹分析更直观显示，治疗组已形成明确的空间记忆策略。

病理改变与超微结构修复
HE染色揭示EGb761有效阻止了海马CA1区锥体神经元丢失，核固缩率从模型组的62%降至23%。透射电镜观察到治疗组线粒体肿胀减轻，自噬体数量减少80%，内质网扩张和核膜溶解现象明显改善。

凋亡与自噬的双重调控
免疫组化显示EGb761使cleaved caspase-3阳性细胞减少68%，LC3-II表达下调54%。Western blot进一步证实，EGb761通过抑制ROS-P22/P47-JNK轴，降低p-c-JUN和P53水平；同时激活Wnt/β-catenin通路，使β-catenin表达提升2.1倍，进而下调IRGM、TFEB等自噬相关蛋白。当加入DKK1阻断该通路时，EGb761的神经保护作用被显著抵消。

这项研究首次系统阐明了EGb761通过"ROS-Wnt/β-catenin-IRGM"信号轴协调调控神经元凋亡与自噬的分子机制。特别值得注意的是，EGb761对自噬的抑制作用呈现剂量依赖性——高剂量组LC3-II/LAMP1表达量仅为低剂量组的60%，这为临床剂量选择提供了实验依据。研究还创新性地发现IRGM作为自噬-凋亡交叉调控的关键节点，其表达受P53直接调控，这为理解VD的病理进程开辟了新视角。

从转化医学角度看，该成果不仅为EGb761治疗VD提供了高级别证据，更揭示了Wnt/β-catenin通路作为多靶点干预枢纽的临床价值。研究者特别指出，EGb761与传统VD治疗药物联用可能产生协同效应，这种"中西医结合"策略有望成为突破当前治疗瓶颈的新路径。未来研究可进一步探索EGb761对血脑屏障通透性的影响，以及其在人类VD患者中的长期疗效与安全性。