双靶向自组装纳米囊泡负载雷公藤甲素前药与Rg3协同治疗胰腺癌

为解决胰腺癌治疗中雷公藤甲素(TP)水溶性差、毒性高及肿瘤微环境免疫抑制等问题，研究人员设计了一种新型双靶向纳米囊泡(NVs)，通过共载TP-PEG-SS前药与人参皂苷Rg3，实现线粒体靶向递送与M2巨噬细胞重编程。该研究证实NVs能显著增强抗肿瘤协同效应，降低系统毒性，为胰腺癌治疗提供新策略。

　　

胰腺癌作为恶性程度最高的肿瘤之一，五年生存率不足5%，临床面临化疗耐药、免疫抑制微环境和缺乏靶向治疗手段等挑战。雷公藤甲素(TP)虽具有显著抗胰腺癌活性，但其水溶性差、全身毒性大等问题限制临床应用。与此同时，肿瘤相关巨噬细胞(M2型TAMs)通过分泌免疫抑制因子促进肿瘤进展，而传统药物难以特异性调控这一微环境。如何实现药物精准递送并协同调控肿瘤免疫微环境，成为突破治疗瓶颈的关键。

河南中医药大学研究人员在《Materials Today Bio》发表研究，通过合成线粒体靶向的TP-PEG-SS前药，与免疫调节剂人参皂苷Rg3共同自组装形成纳米囊泡(NVs)，实现"双靶向"治疗。该纳米系统利用Rg3的葡萄糖转运蛋白GLUT-1识别能力靶向M2巨噬细胞，同时通过前药中的阳离子成分靶向肿瘤线粒体，最终通过诱导肿瘤细胞凋亡和M2-to-M1表型转化发挥协同抗肿瘤作用。

研究采用薄膜分散法制备NVs，通过动态光散射(DLS)和透射电镜(TEM)表征纳米颗粒特性；利用激光共聚焦显微镜(CLSM)和流式细胞术验证双靶向能力；通过qRT-PCR和免疫荧光分析巨噬细胞表型转化；建立Pan02荷瘤小鼠模型评估体内抗肿瘤效果及安全性。

3.1 TP-PEG-SS前药的合成与表征
通过三步反应将TP、聚乙二醇(PEG)和盐酸水苏碱(SS)共价连接，核磁共振(¹H-NMR)显示2.76 ppm处新峰证实成功合成。X射线衍射(XRD)显示前药结晶度降低，傅里叶变换红外光谱(FT-IR)在1678 cm^-1出现酰胺键特征峰，证实TP与SS通过PEG桥接。

3.2 纳米囊泡的制备与特性
NVs粒径为119.17±1.34 nm，zeta电位+12.40 mV，包封率TP达86.21%、Rg3达91.30%。体外释放显示36小时内持续释放TP(84.74%)和Rg3(87%)，血清稳定性实验证实其在PBS中可稳定存在48小时。

3.3 双靶向细胞摄取机制
激光共聚焦显示C6-SS NVs在肿瘤细胞线粒体的共定位率达74%(C6 NVs仅49%)，流式检测表明Rg3修饰使NVs在M2巨噬细胞的摄取量提高2倍。Pearson系数分析证实SS修饰显著增强线粒体靶向效率(P<0.0001)。

3.4 体外抗肿瘤效应
NVs的IC₅₀(2.15 μg/mL)显著低于游离TP-PEG-SS(10.66 μg/mL)，协同指数分析显示TP与Rg3具有强协同效应。流式细胞术显示NVs使肿瘤细胞凋亡率提升至56.02%(游离TP仅7.34%)。

3.5 M2巨噬细胞重编程
NVs处理使M2巨噬细胞中M1标志物CD86⁺细胞比例从12.3%升至47.8%，qRT-PCR证实iNOS mRNA表达上调4.3倍(P<0.01)，Arg-1表达下降68%。

3.6 体内靶向与药效
近红外成像显示DID-SS NVs在肿瘤区域富集量是普通纳米粒的10.6倍。荷瘤小鼠实验中，NVs组肿瘤体积抑制率达81.3%，显著优于游离TP组(45.2%)。免疫荧光显示肿瘤组织iNOS⁺ M1巨噬细胞增加3倍，CD206⁺ M2细胞减少72%。

3.7 安全性评价
NVs组小鼠体重稳定，血液生化指标(ALT/AST)正常，而游离TP组出现肝细胞水肿。溶血实验证实NVs在350 μg/mL浓度下溶血率<5%，符合生物安全性要求。

该研究创新性地将中药活性成分与现代纳米技术结合，通过"线粒体-免疫微环境"双靶向策略突破胰腺癌治疗瓶颈。TP-PEG-SS前药解决原药毒性问题，Rg3介导的M2巨噬细胞重编程重塑免疫抑制微环境，自组装纳米囊泡实现协同增效。这种双靶点协同干预模式为实体瘤治疗提供新思路，兼具科学创新性与临床转化潜力。研究证实NVs能同步增强药物靶向性、免疫调节作用和安全性，为中药活性成分的现代化应用提供典范。