唾液细胞系中人类肠道病毒复制的突破：揭示新型传播途径与低成本监测平台

本研究针对人类肠道病毒（如诺如病毒NoV）体外培养困难、传统检测方法无法区分病毒活性的难题，创新性地利用唾液细胞系（NS-SV-TT-DC/AC）成功复制了包括NoV GI/GII、轮状病毒（RV）、腺病毒41型（AdV41）等9种肠道病毒，证实了口腔可能是肠道病毒初始感染位点。研究首次在废水样本中实现多病毒共感染模型构建，为环境病毒监测提供了低成本、高效的新平台，对公共卫生干预策略具有重要指导意义。

　　

人类肠道病毒是引发全球急性胃肠炎的主要病原体，传统观点认为其通过粪-口途径传播并在肠道复制。然而诺如病毒（NoV）等难以体外培养的特性长期阻碍研究进展，现有的人肠道类器官（HIEs）模型虽能支持复制但成本高昂。更矛盾的是，分子检测（如qPCR）虽灵敏却无法区分病毒活性，导致公共卫生风险评估偏差。近年发现唾液中含有肠道病毒RNA的现象引发猜想：口腔是否才是病毒感染的"第一战场"？

为解决这一科学谜题，印第安纳大学的研究团队在《Science of The Total Environment》发表创新研究。他们采用SV40转化的唾液腺细胞系（NS-SV-TT-DC/AC），通过qPCR定量、病毒增殖曲线分析等技术，系统评估了14份废水样本中9种肠道病毒的复制能力。关键突破在于首次证实唾液细胞可支持NoV GI/GII的活性复制，且发现80%废水样本存在多病毒共感染现象。

主要技术方法
研究使用NS-SV-TT-DC（导管细胞）和NS-SV-TT-AC（腺泡细胞）两种唾液细胞系，分别用KGM-2和K-SFM培养基培养。检测样本包括实验室适应株、临床粪便样本和市政废水浓缩物，通过qPCR定量病毒基因组浓度（GC），以log₁₀增长值判定复制活性。

腺病毒复制时序特征
AdV41在NS-SV-TT-AC细胞中呈现典型增殖曲线：2天达1.43 log₁₀增长，4天达峰值1.86 log₁₀，7天回落至1.6 log₁₀，证实唾液细胞支持完整病毒生命周期。

唾液细胞病毒复制的突破性发现
研究成功复制了AdV41、星状病毒1型（AstV1）、轮状病毒（RV）、甲肝病毒（HAV）、柯萨奇病毒B3/B1（CVB3/B1）、肠道病毒71型（EV-A71）、呼肠孤病毒1型（ReoV1）及NoV GI/GII，GC增长范围0.58-5.11 log₁₀。特别值得注意的是，42%废水样本显示NoV活性复制，且80%样本存在2种以上病毒共感染。

唾液细胞模型的科学价值
该研究颠覆了"肠道专属复制"的传统认知，揭示口腔可能是病毒入侵的首个门户。唾液细胞模型相较HIEs成本降低80%，且无需添加胆汁酸等辅助因子，为环境监测提供三大优势：①可检测废水原始样本 ②支持多病毒并行分析 ③准确区分活性/非活性病毒。

这项研究为理解肠道病毒多途径传播机制提供了实验依据，建立的唾液细胞平台将显著提升环境病毒监测效率。未来或可基于此开发口腔消毒新策略，并为疫苗研发提供更经济的体外评价系统。论文中关于NoV在唾液细胞中复制效率的数据（3 log₁₀/4天）尤其值得关注，这为解释病毒通过飞沫传播的流行病学现象提供了实验室证据。