熊果酸通过Notch3/NOX4通路调控肝星状细胞活化逆转肝纤维化的机制研究

【编辑推荐】本研究针对肝纤维化治疗中Notch3与NOX4信号通路的交互机制这一科学问题，通过体内外实验证实熊果酸（UA）通过抑制Notch3/NOX4通路关键分子（Hes1、Col1α1等），显著抑制肝星状细胞（HSCs）活化并逆转CCl4诱导的小鼠肝纤维化，为靶向干预纤维化提供了新策略。

　　

肝纤维化作为慢性肝病发展的关键病理阶段，全球约15亿患者深受其害，每年导致200万人死于肝硬化或肝癌。尽管近年研究发现纤维化具有可逆性，但临床仍缺乏高效靶向治疗药物。在这一背景下，肝星状细胞（HSCs）的活化被视为纤维化进程的核心环节——当肝脏受损时，这些原本储存维生素A的静息态细胞会转化为肌成纤维细胞，大量分泌胶原等细胞外基质（ECM）。Notch3和NOX4作为两个关键驱动因子，虽在肺损伤、糖尿病肾病等疾病中被发现存在交叉调控，但它们在肝纤维化中的相互关系仍是未知领域。与此同时，中药单体熊果酸（UA）虽显示出抗纤维化潜力，其具体作用靶点却始终未能阐明。

南昌大学第一附属医院的研究团队在《Chemico-Biological Interactions》发表的研究，首次揭示了UA通过Notch3/NOX4轴逆转肝纤维化的分子机制。研究采用C57BL/6J小鼠CCI₄肝纤维化模型和LX2细胞系，通过基因沉默（siRNA）、抑制剂干预、Western blot、免疫组化等技术，系统评估了UA对HSCs活化及Notch3/NOX4通路的调控作用。

【UA attenuates hepatic fibrosis and liver injury in mice】
通过HE染色、天狼星红染色等病理学分析发现，UA治疗显著改善了CCI₄组小鼠的肝小叶结构紊乱和胶原沉积。分子水平检测显示，UA能同步下调纤维化标志物Col1α1、α-SMA及Notch3/NOX4通路关键分子表达，且效果优于单独使用Notch3抑制剂DAPT或NOX4抑制剂GLX351322。

【Notch3 regulates NOX4 expression in HSCs】
基因沉默实验揭示级联调控关系：沉默Notch3可显著降低NOX4表达，但沉默NOX4却不影响Notch3表达。当UA与Notch3沉默联用时，对HSCs活化的抑制效果未出现叠加效应，证实UA主要通过Notch3发挥作用。

【Discussion】
研究阐明Notch3是NOX4的上游调控因子，二者构成正反馈环路：Notch3通过转录因子Hes1促进NOX4表达，而NOX4产生的活性氧（ROS）又进一步激活Notch3信号。UA通过阻断这一环路，同时抑制HSCs的增殖、活化并诱导其凋亡。

该研究不仅首次绘制了肝纤维化中Notch3-NOX4的调控网络，更将UA这一传统中药成分的作用机制精确锚定至分子通路层面，为开发基于UA的靶向抗纤维化药物提供了理论依据。值得注意的是，UA对Notch3/NOX4通路的双重抑制作用展现出比单一靶点抑制剂更优的治疗效果，这种"一石二鸟"的特性使其具有显著的临床转化潜力。