塞浦路斯库蚊种群中双氟苯脲抗性等位基因的多重独立起源首次发现及其公共卫生意义

本研究首次在塞浦路斯库蚊(Culex pipiens)种群中发现双氟苯脲(DFB)抗性突变I1043F，揭示该抗性等位基因存在TTT和TTC两种编码形式，并通过系统发育分析证实其独立于地中海其他地区的起源。该发现为蚊媒抗药性管理提供重要依据，对西尼罗河病毒(WNV)防控具有警示意义。

　　

蚊媒传染病每年导致全球超过70万人死亡，其中库蚊(Culex pipiens)是西尼罗河病毒(WNV)在欧洲的主要传播媒介。化学杀虫剂仍是防控的主要手段，但抗药性的出现严重威胁防治效果。双氟苯脲(DFB)作为抑制几丁质合成的昆虫生长调节剂，是当前欧盟批准用于蚊虫控制的少数有效药剂之一。近年来，地中海多个地区陆续报道库蚊对DFB产生抗性，涉及chs1基因1043位点的突变(I1043L/M/F)，但塞浦路斯——这个近年频发WNV疫情的地区——尚未有相关研究。

来自罗马大学等机构的研究团队在《Parasites》发表论文，首次调查了塞浦路斯库蚊DFB抗性现状。研究人员采集了塞浦路斯4个行政区18个地点的库蚊样本，通过chs1基因片段测序检测抗性突变，并结合系统发育分析追溯抗性等位基因的进化起源。关键技术包括：基于地理风险分层的采样设计、CTAB法DNA提取、chs1基因特异性PCR扩增、Sanger测序，以及使用DnaSP和MEGA软件进行单倍型网络构建和系统发育分析。

研究结果部分：
【背景】证实DFB通过作用于chs1基因导致昆虫蜕皮异常死亡，但意大利、土耳其等地已发现三种抗性突变(I1043L/M/F)，抗性倍数最高达15,000倍。

【方法学】创新性地采用相位算法解析杂合位点，设置90%的后验概率阈值确保单倍型推断可靠性，获得60个chs1等位基因序列(GenBank登录号PQ898938-PQ898997)。

【抗性分布】在所有调查行政区均检出I1043F突变，频率最高达55%(拉纳卡地区)，并首次发现TTT和TTC两种苯丙氨酸编码形式。

【进化分析】系统发育网络显示：1)塞浦路斯的I1043F等位基因与意大利(MZ494156-MZ494187)、土耳其种群具有不同遗传背景；2)两种密码子对应的等位基因存在多个核苷酸差异，支持多重独立起源假说。

结论与讨论：
该研究首次证实塞浦路斯库蚊存在DFB抗性，扩展了抗性等位基因的地理分布图谱。发现TTT密码子这一新变异形式，为抗性机制研究提供新线索。系统发育证据表明I1043F在地中海地区至少独立进化三次，这种"多点爆发"模式凸显抗性演化的复杂性。研究结果具有重要公共卫生价值：塞浦路斯2019年曾暴发WNV疫情，而DFB是当地市政蚊控的常用药剂。作者建议：1)将抗性监测纳入常规防控体系；2)开发替代性防控策略；3)扩大检测至白纹伊蚊等病媒物种。该研究为理解抗性进化规律和实施区域化抗性管理提供了科学依据。