华正散积方通过Keap1/Nrf2通路诱导铁死亡抑制肝癌细胞进展的机制研究

本研究针对肝癌治疗中Keap1/Nrf2通路异常导致的铁死亡（ferroptosis）抵抗问题，揭示了传统中药复方华正散积方（HZSJF）通过上调Keap1、抑制Nrf2/HO-1信号轴，显著降低GPX4、FTH-1和SLC7A11表达，从而促进脂质过氧化和Fe2+蓄积，最终诱导肝癌细胞铁死亡。该研究为肝癌的天然多靶点治疗提供了新策略。

　　

肝癌是全球死亡率最高的恶性肿瘤之一，尤其在中国等乙肝高发地区形势严峻。当前治疗面临两大难题：一是肿瘤细胞通过Keap1/Nrf2抗氧化通路异常激活获得耐药性；二是传统化疗药物缺乏特异性靶向能力。铁死亡（ferroptosis）作为一种新型细胞死亡方式，因其依赖铁离子和脂质过氧化的独特机制，成为突破肝癌治疗瓶颈的新希望。然而，如何精准调控这一过程仍是未解之谜。

吉林省科技厅资助的研究团队在《Journal of Ethnopharmacology》发表论文，系统阐释了传统中药华正散积方（Hua Zheng San Ji Fang, HZSJF）的分子机制。该复方由11味药材组成，临床显示对肝癌具有显著疗效。研究人员采用双煎法制备741 g/L浓缩提取物，通过转录组学分析结合FerrDb数据库筛选，发现HZSJF特异性调控铁死亡相关基因簇。

关键技术方法
研究使用SK-HEP-1和HepG2细胞系及裸鼠移植瘤模型，通过CCK-8、Transwell等实验评估细胞活性与转移能力；采用qRT-PCR、Western blot检测Keap1/Nrf2通路关键分子；运用免疫荧光和生化试剂盒测定Fe²⁺、MDA、GSH等铁死亡标志物；通过Keap1过表达验证靶点特异性。

Transcriptomic Analysis Reveals HZSJF Regulates Ferroptosis-Related Genes and the Keap1/Nrf2 Pathway
转录组分析显示，HZSJF处理显著改变FAR1、ATM等铁死亡调控因子表达，并富集于Keap1/Nrf2通路。基因互作网络证实GPX4、SLC7A11等关键抑制因子被下调，而脂质过氧化驱动因子FAR1上调。

Results
体外实验表明，HZSJF使肝癌细胞活力下降63%，迁移能力降低71%。机制上：① 提升细胞内Fe²⁺浓度2.3倍；② 使MDA（丙二醛）水平升高198%；③ 耗竭GSH（谷胱甘肽）至对照组的32%；④ Western blot显示GPX4蛋白表达减少82%。这些效应可被铁死亡抑制剂Fer-1逆转。

Discussion
研究首次阐明HZSJF通过"Keap1上调→Nrf2核转位抑制→抗氧化防御系统崩溃"的三级作用模式诱导铁死亡。特别值得注意的是，该复方在裸鼠模型中使肿瘤体积缩小58%，且未出现肝毒性，其多组分协同作用克服了单靶点药物的局限性。

结论与意义
该研究不仅证实传统中药可通过现代分子机制发挥作用，更重要的是揭示了Keap1/Nrf2/GPX4轴作为铁死亡调控的核心靶标。华正散积方（HZSJF）展现的"多靶点-低毒性"特性，为开发新一代肝癌治疗药物提供了范式。未来研究可进一步解析其11味药材的协同配伍规律，推动中医药现代化进程。