miR-106b-5p通过下调KCNQ2表达促进雄性大鼠切口痛的新机制研究

术后疼痛管理面临药物副作用大、疗效不足的临床挑战。四川大学华西第二医院团队聚焦Kv7.2（KCNQ2）钾离子通道在切口痛中的作用机制，发现miR-106b-5p通过靶向抑制KCNQ2表达增强背根神经节（DRG）神经元兴奋性，而激动剂Retigabine可逆转痛觉超敏。该研究为术后疼痛提供了新的治疗靶点，发表于《The Journal of Pain》。

　　

术后疼痛是临床常见难题，现有镇痛药物常伴随恶心、呼吸抑制等副作用，且难以满足加速康复外科（ERAS）的需求。疼痛调控的核心在于外周神经元兴奋性改变，而电压门控钾通道Kv7（KCNQ）家族通过介导M电流（M-current）在稳定静息膜电位中起关键作用。然而，KCNQ2在急性术后痛中的作用机制尚不明确，其上游调控网络更是未知领域。

四川大学华西第二医院的研究团队针对这一科学问题，在雄性Sprague-Dawley大鼠足底切口模型中展开研究。他们发现：手术切口导致背根神经节（DRG）中KCNQ2表达在术后4小时和1天显著降低，而脊髓中未见变化。免疫荧光显示KCNQ2与痛觉传导相关的CGRP⁺和IB4⁺神经元共定位减少。电生理实验证实，KCNQ2拮抗剂XE991使神经元去极化，而激动剂Retigabine则能逆转切口诱导的神经元超兴奋性。行为学检测表明，Retigabine通过腹腔或局部给药均可显著改善累积疼痛评分（CPS）、机械撤退阈值（MWT）和热撤退潜伏期（TWL）。

研究进一步揭示切口会上调miR-106b-5p表达，该microRNA通过结合KCNQ2 mRNA的3'非翻译区（3'-UTR）抑制其翻译。利用腺相关病毒（AAV）递送miR-106b-5p海绵序列可恢复KCNQ2表达并缓解痛觉过敏。双荧光素酶报告基因实验验证了miR-106b-5p与KCNQ2的靶向关系。

关键技术包括：足底切口痛模型建立、全细胞膜片钳记录神经元电活动、Western blot和qPCR检测基因表达、AAV介导的基因干预、双荧光素酶报告系统验证靶点关系等。研究采用6-8周龄雄性SD大鼠（n=110），实验设计遵循双盲原则。

主要结果呈现为：

1. KCNQ2表达谱：切口导致DRG中KCNQ2 mRNA和蛋白水平下降，但KCNQ3无变化；免疫荧光显示其在C纤维神经元中共定位减少。
2. 神经元兴奋性改变：切口使DRG神经元静息膜电位（RMP）去极化9.16 mV，动作电位阈值降低41.4%，M电流幅度减少33.5%。
3. 药理学干预：Retigabine使切口侧神经元超极化7.6 mV，系统性给药使MWT从2.1±0.3g提升至6.5±1.2g。
4. miRNA调控机制：miR-106b-5p在术后上调2.7倍，AAV-sponge使其表达降低68%并恢复KCNQ2水平。

讨论部分指出，该研究首次阐明miR-106b-5p/KCNQ2轴在急性术后痛中的调控作用。尽管KCNQ2在DRG表达量较低，但其变化足以改变神经元兴奋性。值得注意的是，Retigabine对机械痛的改善优于热痛，可能与IB4⁺神经元中KCNQ2下调更显著有关。研究局限性包括仅使用雄性动物、未验证miR-106b-5p单独过表达效应等。

这项由Jieshu Zhou、Hao Li等完成的研究，不仅为术后疼痛提供了新的治疗靶点，也为理解microRNA调控离子通道的时空特异性提供了范例。未来开发靶向miR-106b-5p或KCNQ2的精准镇痛策略，可能突破现有药物局限，具有重要转化价值。