半夏块茎中生物碱的分离鉴定及其通过NMDAR/p-CamK II/PKG通路对Aβ25-35诱导的PC-12细胞损伤的保护作用研究

研究人员针对阿尔茨海默病（AD）的治疗需求，从传统中药半夏（Pinellia pedatisecta）块茎中分离出21种生物碱（含9种新化合物），通过光谱学及ECD分析解析结构，并发现其中11种化合物（如1、2、5-10等）能显著抑制Aβ25-35诱导的PC-12细胞损伤，首次揭示化合物2和5通过调控NMDAR/p-CamK II/PKG通路发挥神经保护作用，为AD天然药物研发提供新依据。

　　

阿尔茨海默病（AD）如同记忆的"橡皮擦"，全球每3秒就新增一例患者，其核心病理特征——β淀粉样蛋白（Aβ）沉积和神经纤维缠结，至今缺乏有效治疗手段。传统中药半夏（Pinellia pedatisecta）在民间早有"化痰开窍"的记载，但究竟哪些成分能对抗AD？这成为破解AD治疗困局的新思路。中国科学院某研究团队从半夏块茎中展开了一场"分子寻宝"，成果发表于《Phytochemistry》。

研究团队运用高效液相色谱分离技术，结合核磁共振（NMR）、高分辨质谱（HRESIMS）和电子圆二色谱（ECD）分析，通过Rh₂(OCOCF₃)₄诱导构型确认和DP4+概率计算，从河南、河北等地采集的半夏样本中鉴定出21种生物碱，包括13个新发现化合物（如1-13）。

结构解析
化合物1的C₁₅H₁₈N₂O₄结构通过¹H NMR中苯环特征峰（δ_H 7.20-7.27）和羧基碳信号（δ_C 181.5）得以确认，其绝对构型通过Rh₂-ECD实验首次确定。

生物活性
MTT法显示化合物1、2、5-10及16-20对Aβ_25-35损伤的PC-12细胞存活率提升达30%以上。流式细胞术进一步揭示化合物2和5能将细胞凋亡率从模型组的45%降至18%，免疫荧光证实其通过抑制N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDAR）过度激活，阻断磷酸化钙调蛋白激酶II（p-CamK II）和蛋白激酶G（PKG）级联反应。

结论与意义
该研究不仅首次系统阐明半夏抗AD的物质基础，更发现NMDAR/p-CamK II/PKG这一全新干预靶点。化合物2和5的神经保护机制为开发抗AD天然药物提供了"双保险"：既减少Aβ毒性，又调控神经元钙信号。团队采用的Rh₂-ECD技术为复杂生物碱构型鉴定树立了新范式，而DP4+计算与光学旋转数据的结合策略，将成为天然产物研究的标杆方法。这项源自传统中药的发现，正为对抗AD这场"记忆保卫战"注入新的希望。