大黄鱼清道夫受体MARCO的免疫机制解析及其在病原防御中的关键作用

研究人员针对大黄鱼(Larimichthys crocea)天然免疫防御机制展开研究，成功克隆鉴定出清道夫受体MARCO(LcMARCO，PQ842624)，证实其SRCR结构域可特异性结合溶藻弧菌等病原体，并通过构建MARCO-EGFP真核载体揭示其跨膜定位特征。进一步解析了包含MAPK、ERK2、TNF-α等10个组分的SRA信号通路框架，提出MARCO-MVP-PAK-P38-IL-1和MARCO-MVP-PAK-MAPK-ERK-TNF-α两条潜在信号路径，为鱼类免疫防御系统研究提供新视角。

　　

这项研究深入解析了大黄鱼(Larimichthys crocea)中具有胶原结构的巨噬细胞受体(MARCO)的免疫机制。科研人员成功克隆获得1548 bp的全长cDNA序列(命名为LcMARCO，登录号PQ842624)，其开放阅读框1218 bp编码405个氨基酸，预测分子量42 kDa，等电点(pI)6.01。通过BLASTp比对和系统进化分析发现，LcMARCO与其他鱼类MARCO具有高度相似性，特别是在清道夫受体富含半胱氨酸结构域(SRCR)区域。

研究团队在大肠杆菌DE3系统中高效表达并纯化了LcMARCO及其SRCR结构域，Western blot(WB)实验证实其能特异性结合溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、哈维氏弧菌(V. harveyi)和副溶血弧菌(V. parahaemolyticus)。通过构建MARCO-EGFP真核重组载体转染HEK293T细胞，观察到LcMARCO主要定位于细胞膜，证实其跨膜蛋白特性。

为探索LcMARCO的信号转导机制，研究人员从大黄鱼中鉴定了SRA信号通路的10个关键组分，包括：巨噬细胞受体(MARCO)、主要穹窿蛋白(MVP)、蛋白酪氨酸激酶(PTK)、Rac1、PAK2样丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PAK)、核糖核酸酶P/MRP亚基p38(Rpp38)、白细胞介素-1(IL-1)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、细胞外信号调节激酶2(ERK2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)。在副溶血弧菌感染实验(1×10⁸ CFU/mL)中，发现MARCO在24小时即出现上调表达，早于其他基因；而MAPK、ERK和TNF-α则在72小时显著升高。

基于这些发现，研究勾勒出大黄鱼中MARCO信号转导的可能路径：MARCO-MVP-PAK-PTK-P38-IL-1或MARCO-MVP-PAK-MAPK-ERK-TNF-α。这些结果揭示LcMARCO作为重要的跨膜清道夫受体，在大黄鱼抵御病原体的免疫防御系统中发挥着关键作用，为理解鱼类先天免疫机制提供了新的分子线索。