综述：结直肠癌微环境中的三级淋巴结构：探索新的治疗靶点

这篇综述系统探讨了三级淋巴结构（TLS）在结直肠癌（CRC）免疫治疗中的关键作用。文章指出TLS作为肿瘤微环境（TME）中的异位淋巴组织，通过动态招募T/B细胞、树突状细胞（DC）和高内皮微静脉（HEV），形成免疫活性中心，显著提升免疫检查点抑制剂（ICI）疗效。作者强调CXCL13/CCL21趋化因子轴、IL-36γ和LTα1β2-LTβR通路是诱导TLS的核心靶点，并揭示TLS丰度与微卫星不稳定（MSI-H）和稳定（MSS）型CRC的预后相关性，为优化免疫治疗策略提供新思路。

　　

三级淋巴结构的生物学特性

定义与结构特征

三级淋巴结构（TLS）是结直肠癌（CRC）微环境中自发形成的异位淋巴组织，其结构与次级淋巴器官相似，包含B细胞区、T细胞区、生发中心（GC）和高内皮微静脉（HEV）。组织学上可通过H&E染色识别，多分布于肿瘤外围的黏膜层、肌层及脂肪组织中。

分类与组成

根据细胞组成，TLS可分为早期TLS（E-TLS）、初级滤泡样TLS（PFL-TLS）和次级滤泡样TLS（SFL-TLS）。成熟TLS需具备GC和滤泡树突细胞（FDC），其中B细胞占比达60%，T细胞区则富含CD4⁺/CD45RO⁺记忆T细胞。Yamaguchi等进一步按优势细胞亚群将其分为Th细胞主导型、B细胞富集型等，不同亚型预示差异化的免疫治疗响应。

形成机制

TLS形成始于DC分泌的CXCL13和CCL21，招募CD4⁺T细胞与CD83⁺DC形成初始聚集。淋巴组织诱导细胞（LTi）通过LTα1β2-LTβR信号激活内皮细胞分化为HEV，促进淋巴细胞归巢。IL-36γ和血管平滑肌细胞（VSMC）衍生的趋化因子构成正反馈环路，维持TLS稳态。

TLS在CRC抗肿瘤免疫中的作用机制

浆细胞样树突状细胞（pDC）

pDC在TLS中占比约30%，通过激活CD4⁺T细胞和促进B细胞分化为浆细胞，增强抗体依赖性细胞毒性（ADCC）。Kie?ler等发现pDC密度与CRC分期负相关，其与CD8⁺T细胞的共定位预示更好生存。

巨噬细胞

CD68⁺肿瘤相关巨噬细胞（TAM）在TLS中呈现双刃剑效应：M1型通过CXCL9/10招募效应T细胞，而Th2诱导的M2型则促进免疫抑制。临床数据显示TAM富集与CRC复发风险增加相关，靶向TAM极化或成治疗突破口。

高内皮微静脉（HEV）

HEV通过外周淋巴结地址素（PNAd）介导淋巴细胞浸润，其密度在MSI-H型CRC中显著高于MSS型。Zhan等证实HEV可转化"冷肿瘤"为免疫活性状态，与PD-1⁺T细胞浸润正相关。

B细胞及其亚群

CD20⁺B细胞在右半结肠癌中预示良好预后。GC内B细胞经历体细胞高频突变（SHM）和类别转换重组（CSR），产生高亲和力IgG/IgA。抗原呈递B细胞（BAPC）通过CD86⁺共刺激信号增强T细胞活化。

关键趋化因子

CXCL13/CCL21驱动TLS空间组织，CXCL9/10/11反映免疫监视强度。IL-36γ通过自分泌信号促进HEV成熟，CCL19/21-LTβR轴则维持淋巴细胞持续招募。

临床转化研究

TLS丰度与CRC患者无复发生存期延长显著相关。MSI-H型中TLS富集与高肿瘤突变负荷（TMB）相关，而MSS型中成熟TLS同样可增强PD-1抑制剂响应。Feng等提出TLS评分可作为免疫治疗敏感性标志物，尤其对传统耐药的MSS人群。

展望

诱导TLS形成的新型策略包括：靶向CXCL13/CCL21的基因疗法、LTβR激动剂联合ICI、以及IL-36γ激动剂。未来需探索TLS动态演进的单细胞图谱，优化时空特异性干预方案。