SARS-CoV-2 ORF7a蛋白通过激活内皮释放血管性血友病因子(VWF)促进血栓形成的机制研究

COVID-19重症患者常伴随致命性血栓栓塞并发症，但其机制尚未阐明。本研究通过果蝇遗传筛选首次发现SARS-CoV-2附属蛋白ORF7a可激活内皮细胞释放超大分子血管性血友病因子(VWF)，促进血小板黏附及血栓形成，为靶向ADAMTS13/caplacizumab治疗策略提供理论依据。

　　

在COVID-19大流行中，重症患者常出现令人困惑的血栓栓塞并发症，成为导致死亡的关键因素。尽管多项研究观察到患者血浆中血管性血友病因子(von Willebrand factor, VWF)水平异常升高，但病毒如何引发这一凝血瀑布反应的分子机制始终成谜。这一科学问题的破解，对于开发针对性抗血栓治疗策略具有重大临床意义。

为揭开这一谜团，研究人员开展了一项跨物种的创新研究。研究团队首先利用果蝇(Drosophila)遗传筛选系统这一经典模式生物工具，意外发现SARS-CoV-2的开放阅读框7a(ORF7a)蛋白能显著促进果蝇血淋巴(相当于脊椎动物血液)的凝集和纤维形成。这一现象提示ORF7a可能参与调控凝血过程。

为验证这一发现，研究采用多种关键技术：通过构建ORF7a过表达系统，在鼠脾血管内皮细胞(SVECs)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中分析VWF分泌；利用微流控技术模拟动脉剪切力条件，观察ADAMTS13^-/-(缺乏VWF裂解酶)小鼠血小板在活化内皮表面的覆盖动态；采用重组ORF7a蛋白处理人内皮细胞，检测Weibel-Palade小体(储存VWF的特殊细胞器)的分泌活性。

在"Results"部分，研究揭示了三个关键发现：

1. 遗传筛选首次将ORF7a确定为促凝血因子，其在果蝇中引起血淋巴凝集表型。
2. 细胞实验证实ORF7a通过激活内皮细胞，刺激VWF从Weibel-Palade小体大量释放。
3. 功能实验显示ORF7a诱导的VWF释放显著增加血小板在血管损伤部位的黏附，在动脉剪切力下形成更稳定的血栓。

"Conclusions"部分指出，该研究首次阐明SARS-CoV-2 ORF7a蛋白是COVID-19相关血栓形成的重要致病因子，其通过激活内皮-血小板-VWF轴促进血栓形成。这一发现不仅解释了临床观察到的VWF水平升高现象，更提出了靶向干预的新思路：采用重组ADAMTS13(天然VWF裂解酶)或caplacizumab(抗VWF纳米抗体)等特异性阻断VWF-血小板相互作用的治疗策略，可能有效降低COVID-19血栓相关死亡率。

这项发表于《Research and Practice in Thrombosis and Haemostasis》的研究，从进化保守的凝血机制入手，巧妙结合模式生物筛选与哺乳动物系统验证，为理解病毒性凝血障碍提供了全新视角。其创新性在于将病毒附属蛋白功能与宿主凝血系统异常直接关联，为COVID-19及其他病毒感染相关血栓并发症的精准防治奠定了分子基础。