基于低分子量重组Ag1和Ag1V1蛋白的猪囊尾蚴病血清学诊断方法开发

【字体: 时间:2025年06月22日 来源:Veterinary Parasitology 2.0

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  本研究针对猪囊尾蚴病诊断难题,通过克隆表达绦虫囊液低分子量抗原Ag1和Ag1V1,建立高灵敏度(95.3%)和特异性(97.9%)的ELISA检测技术,为疫区筛查和防控提供新工具。

  

研究背景
猪囊尾蚴病是由人畜共患寄生虫Taenia solium(猪带绦虫)幼虫阶段引起的全球性公共卫生问题。在发展中国家,这种被忽视的热带病不仅导致约30%的地方性癫痫病例(神经囊尾蚴病),还造成每头感染猪194欧元的经济损失。现有诊断方法如舌体触诊和肉品检验灵敏度不足,而依赖囊液抗原的免疫印迹技术(EITB)又受限于寄生虫样本获取难度。如何开发稳定、高效的诊断工具成为阻断传播链的关键。

研究机构与方法
印度农业研究委员会-国家兽医流行病学与疾病信息研究所团队在《Veterinary Parasitology》发表研究,通过以下技术路径:1)从印度班加罗尔屠宰场采集自然感染猪的囊尾蚴样本;2)克隆表达8 kDa蛋白家族的Ag1(201 bp)和Ag1V1(203 bp)基因;3)使用pET 32b载体在大肠杆菌表达系统生产重组蛋白;4)建立间接ELISA并与囊液抗原对比验证性能。

研究结果
Amplification and cloning
成功扩增去除信号肽的Ag1(201 bp)和Ag1V1(203 bp)基因,测序显示二者核苷酸相似度83.3%,与GenBank序列OR492303/OR492305一致。

Sequence analysis
Western blot证实重组蛋白可被囊液抗原抗血清识别,符合糖蛋白特征。

Discussion
ELISA性能评估显示:Ag1灵敏度95.3%/特异性91.7%,Ag1V1达93.7%/97.9%。Cohen's kappa值分别为0.726(Ag1)和0.847(Ag1V1),后者更适于高特异性筛查。

结论与意义
该研究首次系统评估重组Ag1V1在猪囊尾蚴病诊断中的优越性,其97.9%的特异性可有效减少假阳性。虽然仍需野外样本验证,但为TSOL18疫苗(Cysvax?)联用策略提供了精准监测工具,对实现"One Health"防控目标具有重要实践价值。

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