日本牙鲆血清淀粉样蛋白P组分(PoSAP)在硬骨鱼中赋予卓越抗菌免疫机制的研究

本研究聚焦日本牙鲆（Paralichthys olivaceus）血清淀粉样蛋白P组分（PoSAP）的抗菌免疫机制。研究人员通过重组蛋白技术（rPoSAP）发现其能特异性结合并凝集细菌（如S. aureus和P. fluorescens），抑制7种病原菌生长并直接杀灭E. tarda。实验证实PoSAP通过激活补体C1qA/C1qC链介导经典途径，增强白细胞趋化、吞噬及ROS产生，并诱导中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）释放。体内实验显示rPoSAP显著抑制细菌扩散，为硬骨鱼抗病育种提供新靶点。

　　

研究背景与意义
水产养殖业中，细菌性疾病如爱德华氏菌病（Edwardsiellosis）和弧菌病（Vibriosis）常造成日本牙鲆等经济鱼类的重大损失。尽管已知血清淀粉样蛋白P组分（SAP）在哺乳动物中具有免疫调节功能，但其在硬骨鱼中的抗菌机制仍不明确。山东某高校团队针对这一空白，系统研究了日本牙鲆SAP（PoSAP）的多重免疫防御功能，成果发表于《Aquaculture》。

关键技术方法
研究采用生物信息学分析PoSAP序列特征；通过原核表达获得重组蛋白rPoSAP；利用体外结合/凝集实验评估其与8种病原菌的互作；采用补体活性检测（C1qA/C1qC互作）和白细胞功能实验（趋化、吞噬、ROS、NETs）；通过细菌攻毒实验验证体内保护效果。实验鱼来自山东烟台养殖场，细菌菌株包括E. tarda和S. aureus等。

研究结果

1. 序列特征
   PoSAP含215个氨基酸，与其它鱼类SAP同源性达55.6–76.1%，具有保守的pentraxin结构域和二硫键（Cys⁷⁸-Cys¹³⁹）。

2. 体外抗菌功能
   rPoSAP可凝集S. aureus和P. fluorescens，对7种菌显示抑菌活性，并直接杀灭E. tarda。血清实验中，rPoSAP通过结合补体C1qA/C1qC链显著增强溶血和杀菌活性。

3. 白细胞激活
   rPoSAP结合外周血白细胞后，上调炎症基因（如TNF-α）、促进吞噬和ROS产生，并诱导中性粒细胞释放NETs。

4. 体内保护效应
   细菌感染后PoSAP表达显著上调，注射rPoSAP的鱼体组织细菌载量降低，证实其增强宿主防御。

结论与意义
该研究首次阐明PoSAP通过三重机制发挥抗菌作用：直接病原清除、补体途径激活和白细胞功能调控。特别是发现PoSAP诱导NETs的形成，为硬骨鱼先天免疫提供了新认知。成果为开发基于SAP的水产抗病制剂奠定理论基础，对解决养殖业细菌性病害问题具有重要应用价值。