土耳其产欧亚槲寄生亚种(Viscum album subsp. austriacum)的植物化学成分分析、分子对接及抗肿瘤活性研究

本研究针对槲寄生(Viscum album)的药用价值开展系统性探究，通过LC-ESI-MS/MS技术鉴定其甲醇提取物(VAA)中氯原酸(155.681 mg/100g)为主要活性成分，结合分子对接(MD模拟与MM/PBSA计算)揭示其对钠-葡萄糖转运蛋白(SGLT)和人雄激素受体的高结合能(8.20 kcal/mol与-40.69 kcal/mol)，体外实验证实其对LNCaP(EC50:53.075 μg/mL)和Caco-2(EC50:68.88 μg/mL)细胞的显著细胞毒性，同时展现α-葡萄糖苷酶抑制和抗氧化(ABTS˙+/DPPH˙)活性，为开发抗糖尿病和抗肿瘤药物提供新思路。

　　

在传统医学中，槲寄生(Viscum album)因其半寄生特性常被视为有害植物，但鲜为人知的是，这种生长在松树、冷杉等乔木上的常绿灌木，早在古希腊时期就被用作治疗关节炎和癫痫的草药。现代研究更发现其提取物对高血压、糖尿病乃至癌症具有潜在疗效，然而关于其亚种Viscum album subsp. austriacum (VAA)的系统性药理研究仍属空白。特别是在土耳其特定生态环境下生长的VAA，其活性成分组成、分子作用机制与临床应用潜力亟待阐明。

针对这一科学问题，来自伊尔迪兹大学的研究团队在《Biocatalysis and Agricultural Biotechnology》发表了一项突破性研究。该工作采用LC-ESI-MS/MS（液相色谱-电喷雾串联质谱）进行植物化学成分鉴定，通过ABTS˙⁺和DPPH˙自由基清除实验评估抗氧化活性，结合α-淀粉酶/α-葡萄糖苷酶抑制实验检测降糖潜力。为阐明分子机制，研究团队运用分子对接技术模拟活性成分与SGLT（钠-葡萄糖共转运蛋白）及人雄激素受体的相互作用，并通过分子动力学(MD)模拟与MM/PBSA（分子力学/泊松-玻尔兹曼表面积）结合能计算验证复合物稳定性。细胞实验采用MTT法测定对LNCaP（人前列腺癌细胞）、Caco-2（人结肠癌细胞）和HEK293（人胚胎肾细胞）的细胞毒性。

Phytochemical content results
LC-ESI-MS/MS分析揭示VAA甲醇提取物中含有16种生物活性成分，其中氯原酸(chlorogenic acid)以155.681 mg/100g的绝对优势成为主要成分，其次是表儿茶素(35.224 mg/100g)和芦丁(29.153 mg/100g)。这种独特的酚酸组成为其后续生物活性奠定了化学基础。

Enzyme inhibitory and antioxidant activities
在降糖活性方面，VAA对α-葡萄糖苷酶的抑制效果显著优于阿卡波糖标准品，而对α-淀粉酶的抑制活性略低于标准。抗氧化实验显示，虽然VAA的ABTS˙⁺(IC₅₀:12.34 μg/mL)和DPPH˙(IC₅₀:15.67 μg/mL)自由基清除能力弱于抗坏血酸，但仍表现出剂量依赖性的显著活性。

Molecular docking studies
分子对接发现氯原酸与SGLT蛋白的结合能高达8.20 kcal/mol，其苯丙素骨架通过氢键与蛋白活性中心的ASP²⁹⁴、GLY²⁷²等关键氨基酸残基形成稳定相互作用。更令人振奋的是，MD模拟证实氯原酸-雄激素受体复合物在100 ns模拟时间内保持稳定，MM/PBSA计算结合能达-40.69 kcal/mol，提示其可能通过阻断雄激素信号通路抑制前列腺癌进展。

Cytotoxic activity
MTT实验数据证实VAA对LNCaP和Caco-2细胞具有选择性毒性，EC₅₀分别为53.075 μg/mL和68.88 μg/mL，而对正常HEK293细胞的毒性较低(EC₅₀>100 μg/mL)，这种癌细胞特异性杀伤特性使其具备良好的药物开发前景。

这项研究首次系统阐明了土耳其产VAA的化学组成与多靶点药理机制：其富含的氯原酸通过双重作用机制——抑制SGLT蛋白调控血糖代谢，同时阻断雄激素受体信号通路发挥抗癌效应。这种"一石二鸟"的作用特点，为开发兼具抗糖尿病和抗前列腺癌功能的天然药物提供了理论依据。特别值得注意的是，研究采用的整合策略——从植物化学分析到分子模拟再到细胞验证，为天然产物研究建立了标准化范式。未来研究可进一步优化提取工艺，开展动物模型验证，并探索氯原酸与其他活性成分的协同效应。