慢性间歇性缺氧驱动背根神经节中M1型巨噬细胞极化及其在疼痛敏感中的作用

睡眠呼吸暂停(OSA)患者常伴随慢性疼痛，但其机制不明。美国德克萨斯大学健康科学中心团队通过建立慢性间歇性缺氧(CIH)小鼠模型，发现背根神经节(DRG)中巨噬细胞向促炎的M1型极化，并鉴定出TLR9信号通路的关键作用。研究证实FDA批准的TLR9拮抗剂羟氯喹(HCQ)可逆转神经元敏化和疼痛行为，为OSA相关疼痛提供了新的治疗靶点。该成果发表于《Brain, Behavior, and Immunity》。

　　

睡眠呼吸暂停(Obstructive Sleep Apnea, OSA)影响着全球超1亿成年人，这类患者不仅夜间反复出现呼吸中断，更普遍存在慢性疼痛症状。临床数据显示，OSA患者对疼痛更敏感，术后需要更高剂量吗啡，且纤维肌痛、类风湿关节炎等慢性疼痛疾病发病率显著升高。然而，间歇性缺氧如何导致外周神经系统疼痛敏感，这个关键问题长期困扰着医学界。

美国德克萨斯大学健康科学中心的Samuel B. Chivers团队在《Brain, Behavior, and Immunity》发表重要研究，通过建立慢性间歇性缺氧(Chronic Intermittent Hypoxia, CIH)小鼠模型，首次揭示背根神经节(Dorsal Root Ganglion, DRG)中巨噬细胞的极化改变是导致疼痛敏感的核心机制。研究发现CIH促使巨噬细胞向促炎的M1型极化，同时抑制抗炎的M2型，而FDA已批准的TLR9拮抗剂羟氯喹(Hydroxychloroquine, HCQ)能有效逆转这种极化状态，缓解神经元过度兴奋和疼痛行为。这项突破不仅阐明了OSA相关疼痛的分子机制，更发现了可直接临床转化的治疗策略。

研究采用多学科技术手段：通过14天CIH小鼠模型模拟OSA病理特征；流式细胞术(FACS)定量分析DRG中M1(CD80、MHC II)和M2(CD163、IL4α)型巨噬细胞标志物；RNA测序鉴定差异表达基因；原代骨髓来源巨噬细胞(BMDM)培养验证TLR9功能；钙成像技术记录DRG神经元兴奋性；结合Von Frey纤维行为学评估机械痛阈变化。

慢性间歇性缺氧改变DRG巨噬细胞极化
免疫荧光和流式结果显示，CIH显著增加DRG中M1型标志物CD38、CD80和MHC II表达，同时降低M2型标志物CD163和IL4α。RNA测序发现TLR9在CIH组巨噬细胞中表达显著上调，提示其可能介导M1极化。

TLR9拮抗逆转M1极化与神经元敏化
Western blot证实HCQ可抑制LPS/IFNγ诱导的M1型标志物iNOS表达。钙成像显示CIH小鼠DRG神经元对KCl刺激反应增强，而HCQ或E6446(TLR9抑制剂)预处理可完全逆转这种过度兴奋。流式分析进一步证实HCQ特异性降低M1标志物，但不影响巨噬细胞总数。

TLR9拮抗缓解CIH诱导的痛觉敏化
行为学实验采用经典痛觉敏化模型：CIH预处理14天后，足底注射PGE₂可诱发持续14天的机械超敏反应。值得注意的是，HCQ虽不能完全消除但能显著缓解这种持续性疼痛，且效果在雌雄小鼠中一致。

讨论部分指出，这是首次系统阐明CIH通过TLR9依赖的巨噬细胞M1极化导致DRG神经元敏化的完整机制。虽然HCQ在动物模型中作用时间较短(与其药代动力学特性一致)，但该发现为临床转化提供重要依据：TLR9可作为OSA相关疼痛的治疗靶点，而HCQ这种已获批药物具有立即临床验证的潜力。研究还创新性地将巨噬细胞极化状态与慢性疼痛的持续特性相联系，为理解"疼痛记忆"的免疫机制开辟了新视角。

未来研究可探索长期HCQ给药方案，或开发新型TLR9靶向药物以维持更持久的治疗效果。该成果不仅对OSA患者有直接临床意义，更为其他缺氧相关疼痛疾病(如慢性阻塞性肺病)的治疗提供新思路。团队特别强调，这种免疫-神经互作机制的发现，可能解释为何OSA患者对阿片类药物需求增加，为开发替代镇痛策略奠定理论基础。