意大利水牛犊中毕氏肠微孢子虫（Enterocytozoon bieneusi）的流行特征及Bovidae家族跨物种传播风险分析

本研究首次报道了意大利南部水牛犊中毕氏肠微孢子虫（E. bieneusi）13.5%的感染率，通过ITS区测序鉴定出YNDCEB-90、A、I三种基因型，其中A型为人兽共患基因型。研究者采用单倍型网络分析揭示Hp9为欧洲Bovidae家族优势单倍型，Hp12为水牛特异性单倍型，为食源性寄生虫防控提供了重要分子流行病学依据。

　　

在意大利南部牧场，水牛(Bubalus bubalis)作为重要的经济畜种，其生产的莫扎雷拉奶酪享誉全球。然而，这些看似健康的动物可能携带一种名为毕氏肠微孢子虫(Enterocytozoon bieneusi)的机会性病原体。这种属于微孢子虫门(Microsporidia)的真菌近缘生物，已被证实能感染236种动物和人类，尤其对艾滋病患者、器官移植者等免疫低下人群构成威胁。更令人担忧的是，超过685个基因型中，许多具有跨物种传播潜力，可能通过粪便污染水源、奶制品等途径进入食物链。尽管在欧洲牛(Bos taurus)中已有较多研究，但关于水牛这一重要畜种的感染状况却长期空白。

来自罗马第二大学的研究团队在《Food and Waterborne Parasitology》发表了一项开创性研究。他们采集了意大利坎帕尼亚地区4个农场37头水牛犊的粪便样本，采用巢式PCR扩增ITS区(内部转录间隔区)并进行测序分析。通过构建最大似然法(Maximum Likelihood)系统发育树和单倍型网络分析，首次揭示了意大利水牛群体中E. bieneusi的流行特征和遗传多样性。

关键技术包括：1) 巢式PCR扩增390bp的ITS区片段；2) 使用IQ-TREE软件基于HKY+G4模型构建系统发育树；3) 整合欧洲牛和水牛的38条GenBank序列构建DatasetEU数据集；4) 采用DnaSP v.6和PoPART软件进行单倍型网络分析。

研究结果显示：
3.1 分子特征与系统发育分析
5份阳性样本(13.5%)鉴定出三种基因型：YNDCEB-90、A和I。其中EbITA_10和EbITA_4与土耳其、中国水牛分离株高度同源，EbITA_9和EbITA_5则与德国、意大利人源株完全匹配。系统发育分析显示这些菌株分别归属于系统发育群1(Group 1)和群2(Group 2)，证实了基因型A(人兽共患型)和I(原认为牛特异性型)在水牛中的存在。

3.2 单倍型分析
欧洲数据集分析发现14种单倍型，多样性指数(Hd)达0.8184。Hp9为优势单倍型(分布于奥地利、捷克等5国)，包含基因型I的变异体；Hp12为意大利-土耳其特有的水牛关联单倍型，与YNDCEB-90基因型相关；Hp11则包含基因型J，在牛和水牛间共享。土耳其菌株展现出最丰富的单倍型多样性，提示该国可能是遗传变异热点区域。

这项研究首次证实：1) 意大利水牛携带具有人兽共患潜力的E. bieneusi基因型；2) 系统发育群2的基因型I可感染水牛，突破了该群仅感染牛的传统认知；3) 单倍型分布模式揭示水牛与牛存在差异性的宿主-寄生虫互作关系。从公共卫生角度，研究强调需要加强水牛养殖场的生物安全管理，特别是对"莫扎雷拉奶酪"生产过程中的巴氏杀菌监管，以及农场周边水体的寄生虫监测。研究团队建议扩大采样规模和地理范围，以更全面评估这一食源性病原体在意大利畜牧业中的传播风险。

该成果由Isabel Guadano-Procesi等学者完成，研究不仅填补了欧洲水牛微孢子虫病的知识空白，更为理解Bovidae家族内病原体传播规律提供了新的分子流行病学框架。随着免疫抑制人群的增多，这类研究对保障食品安全和防范人兽共患病具有日益重要的现实意义。