基于CRISPR-Cas13a RNase的衣壳完整性检测技术：新鲜农产品中鼠诺如病毒(MNV-1)感染性颗粒的高通量筛查方法

为解决传统食品检测方法无法区分传染性/非传染性诺如病毒且依赖昂贵RT-qPCR技术的痛点，研究人员开发出CRISPR FRESH检测体系。该技术通过CRISPR-Cas13a与RNase衣壳完整性联用，可特异性识别具完整衣壳的鼠诺如病毒(MNV-1)，检测限达2.59 log10 gc/25 g（5 gc/rx），在蓝莓和生菜样本中展现出优于RT-qPCR的灵敏度，为食源性病毒传染风险评估提供创新工具。

　　

传统食品检测技术面临两大挑战：无法区分具有传染性的人类诺如病毒颗粒，且依赖成本高昂的逆转录定量PCR(RT-qPCR)设备。相比之下，CRISPR基因编辑技术驱动的检测方案不仅成本更低，还能实现相当的灵敏度与特异性。最新研究突破性地将CRISPR-Cas13a核糖核酸酶系统与RNase衣壳完整性检测相结合，开发出名为"食源性RNA病毒高通量酶传感技术(CRISPR FRESH)"的创新平台。

该技术通过识别鼠诺如病毒(MNV-1)完整衣壳——传染性的关键生物标志物，实现了2.59 log₁₀ gc/25 g（每个反应5个基因组拷贝）的检测极限。实验证实其对甲型肝炎病毒、人类诺如病毒GI/GII型及轮状病毒的合成DNA靶标均无交叉反应。在生菜和蓝莓样本中，针对经RNase预处理的低拷贝数MNV-1，CRISPR FRESH展现出比RT-qPCR更优异的检测灵敏度。

值得注意的是，RT-qPCR可提供定量数据，而CRISPR检测仅作定性判断。这项研究标志着CRISPR技术首次应用于食品样本中潜在传染性病毒的鉴别，为食品安全监测开辟了新途径。