MEK抑制剂作为辅助疗法成功治疗儿童MAP4-RAF1融合阳性实体瘤的病例报告与机制解析

本研究针对儿童RAF1融合阳性实体瘤治疗困境，通过分子模拟与临床验证相结合的策略，首次报道了MEK抑制剂Trametinib对MAP4-RAF1exon15:exon10融合肿瘤的显著疗效。北京儿童医院团队发现该融合蛋白通过破坏RAF1自抑制构象（S258/S621）激活MAPK通路，经100次Autodock模拟筛选证实Trametinib比Sorafenib更具靶向优势，最终使化疗耐药患儿获得完全缓解。该研究为罕见儿童肿瘤的精准治疗提供了新范式。

　　

在儿童肿瘤治疗领域，RAF家族基因融合引发的难治性实体瘤始终是临床重大挑战。虽然成人BRAF突变肿瘤对MEK抑制剂响应良好，但RAF1融合在儿童软组织肿瘤中极为罕见，其靶向治疗策略长期缺乏循证依据。更棘手的是，这类肿瘤往往对常规化疗（如VDC/ICE方案）和抗血管生成药物（如Sorafenib）产生耐药，导致患儿陷入"治疗-复发"的恶性循环。这一困境背后，隐藏着两个关键科学问题：RAF1融合如何重构MAPK信号通路的调控机制？现有靶向药物中何种能有效阻断这一异常激活？

北京儿童医院联合多学科团队在《npj Precision Oncology》发表了一项突破性研究。该团队通过全外显子测序（NGS）鉴定出一例8岁男性患儿盆腔恶性梭形细胞肿瘤存在MAP4-RAF1exon15:exon10融合。当传统化疗和手术均告失败后，研究人员采用AlphaFold2模拟发现：MAP4的39个氨基酸以环状构象插入RAF1的PKD区域，通过形成2.5?氢键（G356-S259）破坏RAF1自抑制状态；更关键的是，Zdock模拟显示该融合使14-3-3二聚体与RBD/CRD区域距离增加50%（从18.3?→48.2?），显著增强KRAS对RAF1的招募（ΔiG kcal/mol从0降至-3.7）。基于100次Autodock筛选，团队突破性地发现Trametinib与RAF1/MEK复合物的结合能（<-7 kcal/mol）远优于Sorafenib（p<2.2e-16），这一预测在临床实践中得到完美验证——患儿接受5个月Trametinib单药治疗后肿瘤显著缩小，术后病理显示纤维组织增生伴钙化，随访5个月无复发。

关键技术方法包括：1）基于GRCh37.p13基因组构建MAP4-RAF1融合蛋白模型（686aa，76.90kDa）；2）采用PyMOL和PDBePISA分析蛋白互作界面；3）CTD数据库筛选19种BRAF/CRAF/MEK抑制剂；4）AutoDock v4.0半柔性对接模拟药物结合特性；5）北京儿童医院伦理委员会批准的临床疗效评估（NCT注册号未提供）。

【患者信息与临床发现】
8岁男性患儿盆腔恶性梭形细胞肿瘤对VDC/ICE化疗仅达部分缓解（PR），术后病理（SMA/S100阳性）证实MAP4-RAF1融合。二代测序显示该融合涉及MAP4第15外显子与RAF1第10外显子连接（GRCh37.p13: c47896850-47896738）。

【MAP4-RAF1融合的分子机制】
结构模拟揭示MAP4 exon15插入导致：1）S259自抑制位点空间位阻；2）14-3-3二聚体结合力下降（化学键数量从16减至9）；3）KRAS-V81与RAF1-F141距离缩短40%。这些变化共同解除RAF1自抑制，持续激活MAPK通路。

【药物筛选与治疗】
在Sorafenib和VITB方案无效后，分子对接显示Trametinib能特异性结合MEK的αC-helix（L115、M219等位点），而Dabrafenib可互补靶向CR3区域。临床实践证实Trametinib使肿瘤缩小至可手术切除，术后放疗（45Gy+9Gy boost）联合Trametinib维持治疗达完全缓解（CR）。

这项研究具有三重里程碑意义：首先，首次阐明MAP4-RAF1融合通过重构14-3-3二聚体空间排布激活MAPK通路的分子机制；其次，建立"结构模拟-药物预测-临床验证"的罕见肿瘤精准治疗范式；最后，为儿童RAF1融合肿瘤提供MEK抑制剂这一明确治疗选择。研究团队特别指出，该融合导致的RAF1构象变化可能对其它"paradox breaker"型抑制剂（如PLX8394）产生交叉耐药，这为下一代RAF抑制剂的开发提供了重要线索。