氯喹通过PI3K/AKT/MDM2信号通路抑制宫颈癌细胞增殖与迁移的机制研究

本研究揭示了抗疟疾药物氯喹（CQ）作为宫颈癌（CC）潜在治疗剂的作用机制。通过网络药理学结合体外实验，发现CQ通过抑制PI3K/AKT/MDM2通路关键靶点（如MDM2、TNF），显著降低HeLa细胞中p-PI3K、p-AKT、p-MDM2蛋白表达（P<0.05），同时上调促凋亡蛋白Bax/cleaved-PARP并下调抗凋亡蛋白Bcl-2，诱导肿瘤细胞凋亡。研究为老药新用提供理论依据，尤其对PI3K通路异常激活的宫颈癌治疗具有重要参考价值。

　　

研究背景

宫颈癌（CC）作为女性生殖系统最高发的恶性肿瘤，全球年新增病例达66.1万例。尽管HPV疫苗和早期筛查技术取得进展，晚期患者的治疗仍面临耐药性和复发挑战。氯喹（CQ）作为经典的4-氨基喹啉类抗疟药，近年被发现具有多途径抗肿瘤特性，但其在宫颈癌中的作用机制尚未明确。研究聚焦PI3K/AKT/MDM2这条与肿瘤进展密切相关的信号轴，该通路异常激活可促进MDM2介导的p53降解，进而抑制细胞凋亡。

研究方法

网络药理学分析：
通过PharmMapper、SwissTargetPrediction等数据库筛选CQ的126个作用靶点，与GeneCards中7846个宫颈癌靶点取交集获得100个共同靶点。STRING数据库构建蛋白互作网络（PPI），核心靶点包括TNF、MDM2（连接度16）、SLC6A4等。KEGG富集分析显示PI3K/AKT通路显著富集（P<0.05）。

体外实验验证：
• 细胞模型：人宫颈癌细胞系HeLa（ATCC CCL-2.1?）与正常宫颈细胞H8对照
• 浓度梯度：25μM（IC₂₀）、75μM（IC₅₀）CQ处理48小时
• 功能实验：CCK-8检测细胞活力（H8细胞无显著影响）、克隆形成实验（75μM组 colony减少53%）、划痕实验（迁移抑制P<0.01）
• 机制检测：流式细胞术显示凋亡率提升2.8倍；Western blot检测到Bax/Bcl-2比值升高，p-PI3K/p-AKT表达降低40%

关键发现

1. 多靶点调控：CQ通过MDM2等核心靶点形成网络化作用，其中PI3K/AKT通路富集评分最高（KEGG通路hsa04151）
2. 双重凋亡诱导：
   • 线粒体途径：Bax上调1.9倍，cleaved-PARP增加3.2倍
   • 信号通路抑制：p-MDM2水平下降62%，提示p53功能恢复
3. 特异性抑制：75μM CQ使HeLa细胞存活率降至53%，但对H8细胞毒性不显著（P>0.05）

机制示意图

研究揭示CQ通过"PI3K/AKT→MDM2磷酸化→p53降解"信号轴的级联抑制，解除肿瘤细胞凋亡阻滞。有趣的是，MDM2作为网络中的关键枢纽（PPI度值排名第二），其抑制作用可能打破PI3K/AKT与p53间的负反馈循环。

研究展望

尽管在HeLa细胞中取得阳性结果，未来需在PDX模型验证体内效果，并探索CQ与顺铂等化疗药的协同作用。值得注意的是，25μM CQ（相当于抗疟治疗血药浓度）已显示抑瘤效果，提示临床转化可能具备可行性。

（注：全文数据均来自原文Fig2-8，统计方法采用ANOVA与t检验，GraphPad Prism 9分析，显著性标记为*P<0.05，**P<0.01）