脑脊液终点稀释RT-QuIC技术定量α-突触核蛋白种子负荷与路易体病神经病理分期及临床严重度的相关性研究

这篇研究通过脑脊液(CSF)终点稀释实时震动诱导转化(RT-QuIC)技术，定量分析α-突触核蛋白(α-syn)种子浓度(SD50)，发现其与路易体病(LBD)神经病理分期(USSLB/LPC)、免疫组化负荷(Rho=0.62)及运动/嗅觉功能评分显著相关(p<0.0001)。该技术对识别新皮质期LBD具有高准确性(AUC 0.86)，为LBD病理分期提供了首个基于生物标志物的量化工具。

　　

引言：路易体病的生物标志物挑战
路易体病(LBD)作为第二大神经退行性疾病，以α-突触核蛋白(α-syn)异常聚集形成的路易小体(LB)为特征。尽管种子扩增实验(SAA)如实时震动诱导转化(RT-QuIC)已显著提升LBD诊断准确性，但其动力学参数易受预处理和分析因素干扰。本研究首次在357例脑捐献者的尸检脑脊液(CSF)中，采用终点稀释(ED) RT-QuIC结合midSIN算法定量α-syn种子浓度(SD₅₀)，探索其与神经病理分期和临床表型的关联。

方法学创新与队列特征
研究纳入亚利桑那脑捐献计划(AZSAND)的357例样本，其中168例经神经病理确诊LBD。通过统一路易体病分期系统(USSLB)和路易病理共识标准(LPC)进行分期，并对10个脑区LB密度进行半定量评分(0-4分)。CSF样本经ED RT-QuIC检测，通过三倍或二倍连续稀释直至阳性反应率≤25%，利用midSIN算法计算SD₅₀（即50%重复反应呈阳性的种子剂量）。

核心发现：定量指标与病理/临床的强关联

1. 病理分期相关性：SD₅₀值(log₁₀SD/ml)在不同LBD分期差异显著(p<0.0001)，新皮质期(USSLB-IV)显著高于脑干优势期(IIa)和边缘系统期(IIb)。LB密度评分与SD₅₀呈强正相关(Rho=0.62)，其中颞叶新皮质(r=0.60)和扣带回(r=0.59)关联最强。
2. 临床意义：SD₅₀越高，UPDRS-III运动评分越差(Rho=0.33)、UPSIT嗅觉功能越低(Rho=-0.33)，但MMSE认知评分无显著关联，提示运动/嗅觉障碍更特异反映α-syn病理负荷。
3. 诊断效能：SD₅₀区分新皮质期LBD的AUC达0.86，结合UPSIT后可提升特异性至82%。在阿尔茨海默病(AD)痴呆亚组中，SD₅₀预测LBD共病理的灵敏度达100%。

技术优势与局限性
ED RT-QuIC通过稀释策略降低动力学变异，比传统RT-QuIC更稳定。但尸检CSF可能高估种子浓度，且需大量阴性CSF作为稀释基质。6例LB阴性/SAA阳性案例的低SD₅₀值提示可能存在超局限病理。

转化医学价值
该研究首次验证CSF α-syn种子定量可作为LBD病理分期的替代指标，为临床试验分层和靶向治疗评估提供新工具。未来需在活体腰椎穿刺CSF中验证该技术，并探索人工基质替代方案以提升可行性。