基于LC-MS/MS的绿色生物分析方法开发与验证：人血浆中盐酸伊格列明的精准定量研究

本研究针对2型糖尿病治疗药物盐酸伊格列明(Imeglimin hydrochloride)的血药浓度监测需求，开发了一种符合US FDA指南的LC-MS/MS生物分析方法。研究人员通过优化色谱条件（Phenomenex Kinetex PFP柱，0.1%甲酸-乙腈流动相），建立了线性范围5-1000 ng/mL、回收率>70%的检测体系，并验证了其在多种稳定性条件下的可靠性。该方法创新性地引入GAPI(0.1)和AGREE(0.85)评估体系，证实其兼具分析效能与环保优势，为糖尿病药物监测提供了绿色解决方案。

　　

在全球糖尿病负担日益加重的背景下，2型糖尿病(T2DM)的精准治疗面临重大挑战。据国际糖尿病联盟统计，全球约90%的糖尿病病例属于T2DM，其特征表现为胰岛素抵抗和β细胞功能障碍。作为新型口服降糖药"格列明类"(glimins)的代表，盐酸伊格列明通过独特的作用机制——靶向胰腺β细胞线粒体、增强葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)——展现出良好的临床前景。然而，现有文献中缺乏符合国际标准的血药浓度检测方法，这严重制约了该药物的治疗监测和药代动力学研究。

来自SSR药学院的研究团队在《Future Journal of Pharmaceutical Sciences》发表的研究，填补了这一技术空白。研究人员开发了基于液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)的生物分析方法，采用卡马西平作为内标(ISTD)，通过甲基叔丁基醚液液萃取的前处理技术，实现了人血浆中盐酸伊格列明的高灵敏度检测（定量限5 ng/mL）。该方法在4分钟内完成分析，药物和内标的保留时间分别为2.20分钟和1.00分钟，显著提升了检测通量。

关键技术方法包括：1）采用ESI正离子模式质谱检测，优化碰撞能量(CE:-30)和干燥气温度(450℃)；2）建立六点校准曲线验证线性关系；3）通过基质因子评估消除血浆成分干扰；4）运用冷冻-解冻循环（-78±8℃）和长期稳定性（30天）验证样本保存条件；5）首次引入GAPI和AGREE软件进行绿色度评估。

研究结果部分显示：
色谱与质谱分析：

优化后的质谱条件使药物与内标达到基线分离，母离子m/z 156.2→71.1的转换具有高度特异性。

准确性与精密度：
校准曲线相关系数(r²>0.99)，批内精密度(%CV)1.10-10.19%，准确度99.28-101.09%，完全符合US FDA指南要求。

稳定性验证：
在极端条件下仍保持优异稳定性：干提取98.18%、湿提取99.99%、冻融循环97.47%，为临床样本运输存储提供了可靠依据。

绿色度评估：

GAPI评分0.1与AGREE评分0.85证实该方法显著减少了有机溶剂消耗（乙腈用量0.5 mL/min），符合绿色化学12项原则。

这项研究的意义在于：首先，建立了首个通过全面验证的盐酸伊格列明血药浓度检测标准，为后续临床研究提供了关键技术支撑；其次，创新的绿色评估体系为生物分析方法的环境友好性设立了新标杆；最后，该方法的高通量特性（4分钟/样本）使其特别适合大规模临床监测。研究人员Chandni V.Chandarana等指出，该技术未来可扩展应用于其他格列明类药物的分析，并为糖尿病精准用药提供新的工具选择。