METTL1介导的m7G修饰通过调控NEK1 mRNA促进口腔鳞癌增殖的机制研究

口腔鳞癌（OSCC）作为头颈部高发恶性肿瘤，其分子机制亟待深入探索。本研究聚焦RNA表观修饰关键酶METTL1，通过m7G MeRIP-seq联合RNA-seq技术，首次揭示METTL1通过催化NEK1 mRNA的5'UTR区m7G修饰增强其稳定性，驱动OSCC细胞周期进程。该发现为OSCC预后标志物和靶向治疗提供新思路。

　　

口腔鳞状细胞癌（OSCC）是全球头颈部恶性肿瘤的主要类型，2020年新增病例超过37万例，其高侵袭性和不良预后一直是临床治疗的难点。尽管已知细胞周期失调、表观遗传改变等因素参与OSCC发展，但具体分子机制尚未阐明。近年来，RNA修饰（如m⁷G）在肿瘤中的作用备受关注，其中甲基转移酶METTL1在多种癌症中异常表达，但其在OSCC中的功能仍是未解之谜。

为解决这一问题，聊城市人民医院的研究团队通过分析GEO数据库和临床样本，发现METTL1在OSCC组织中显著高表达且与不良预后相关。研究者采用基因敲降、动物模型和分子生物学技术，结合m^{7G甲基化RNA免疫共沉淀测序（m7G MeRIP-seq）与转录组测序（RNA-seq），系统揭示了METTL1通过催化NEK1 mRNA的5'非翻译区（5'UTR）m7G修饰，增强mRNA稳定性并促进NEK1表达，最终驱动OSCC细胞G1/S期转换和增殖的分子机制。该成果发表于《Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease》。}

关键技术包括：从25例OSCC患者和15例对照中获取临床样本；通过GEO数据库（GDS4562/4234）分析METTL1表达谱；采用CCK-8、克隆形成和流式细胞术评估细胞增殖与周期；建立裸鼠移植瘤模型验证体内效应；运用m⁷G MeRIP-seq定位修饰位点并结合RNA-seq筛选靶基因；通过双荧光素酶报告基因和RNA稳定性实验解析调控机制。

METTL1在OSCC中高表达且与不良预后相关
分析96例患者数据发现，OSCC组织中METTL1表达显著高于癌旁组织（p<0.01），且高表达患者总生存期更短。体外实验证实，敲降METTL1可抑制SCC15、SCC4和Cal27细胞的增殖能力。

METTL1通过m⁷G修饰调控NEK1表达
m⁷G MeRIP-seq鉴定出NEK1 mRNA的5'UTR存在METTL1依赖性m⁷G修饰位点。敲降METTL1导致NEK1 mRNA半衰期缩短50%，蛋白表达下降60%，证实修饰对mRNA稳定性的调控作用。

NEK1是OSCC增殖的关键效应因子
沉默NEK1可重现METTL1敲降的表型：细胞周期阻滞于G1期（G1期比例增加35%）、克隆形成减少70%，且回补NEK1能部分逆转METTL1缺失的抑制效应。

这项研究首次阐明METTL1-m⁷G-NEK1轴在OSCC中的调控机制，不仅拓展了对RNA表观修饰在肿瘤中作用的认识，还为OSCC提供了新的预后标志物（METTL1）和潜在治疗靶点（NEK1）。作者在讨论中指出，METTL1可能通过类似机制调控其他致癌基因，未来需探索其在不同癌症中的共性规律。该成果为开发靶向RNA修饰的抗肿瘤策略奠定了理论基础。