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SV40大T抗原转染构建人结直肠腺瘤上皮细胞系IHCRA-CELL的建立与鉴定及其在癌前病变研究中的应用
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月24日 来源:Recent Patents on Anti-Cancer Drug Discovery CS4.5
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针对结直肠腺瘤癌前病变机制研究的细胞模型短缺问题,研究人员通过SV40-LT抗原基因转染技术,成功构建了天然低表达LHPP的人结直肠腺瘤上皮细胞系IHCRA-CELL。该细胞系经形态学、qPCR和STR鉴定保持原代细胞特性,填补了癌前病变研究工具空白,为药物筛选和疾病模型构建提供新平台。
这项研究通过猴空泡病毒40(SV40)大T抗原基因转染技术,将SV40-LT过表达慢病毒载体导入原代人结直肠腺瘤息肉上皮细胞,经筛选扩增获得命名为IHCRA-CELL的新型上皮细胞系。
形态学观察显示,这些转染细胞呈现典型上皮样特征:多边形外观、桥粒连接结构和强阳性角蛋白染色,与原代细胞无显著差异。通过短串联重复序列(STR)鉴定,证实该细胞系在现有细胞库中无匹配记录,具有独特性。
定量实时PCR(qPCR)等实验验证,该细胞系成功保留了天然低表达肝细胞核因子4α抑制蛋白(LHPP)的特性。这种通过SV40-LT抗原实现永生化(immortalized)的技术,使IHCRA-CELL成为研究结直肠癌前病变机制、新型药物筛选以及构建体内疾病模型的理想工具。
目前该细胞系已获专利保护,并保藏于中国典型培养物保藏中心。其重要意义在于首次提供了稳定可用的结直肠腺瘤上皮细胞来源,为揭示恶性转化(malignant transformation)机制提供了关键实验材料。
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