寄生蜂Habrobracon hebetor新型重组毒液蛋白Neprilysin（HhNEP）体外抑制宿主免疫的机制研究

本研究针对寄生蜂毒液蛋白调控宿主免疫的机制问题，聚焦Habrobracon hebetor毒液特异性Neprilysin（HhNEP），通过原核表达重组蛋白，首次揭示其可同时抑制Spodoptera litura和Plodia interpunctella幼虫血淋巴酚氧化酶（PPO）激活及血细胞包囊反应，并降低活性氧（ROS）和活性氮（RNS）水平，为害虫生物防治提供新靶点。

　　

在自然界残酷的生存竞赛中，寄生蜂与宿主昆虫上演着精妙的攻防战。Habrobracon hebetor这类外寄生蜂通过毒液注射使宿主永久麻痹，同时精准瓦解其免疫防御，为后代幼虫营造"无菌食堂"。然而，毒液中哪些分子扮演"免疫黑客"角色？如何跨宿主发挥功能？这些问题长期困扰学界。浙江大学等机构的研究团队在《International Journal of Biological Macromolecules》发表的研究，揭开了毒液蛋白Neprilysin（HhNEP）的免疫调控密码。

研究采用转录组与蛋白质组联筛技术锁定毒腺特异性表达的HhNEP，通过原核系统表达重组蛋白。以长期饲养宿主Plodia interpunctella和新引入宿主Spodoptera litura为模型，发现重组HhNEP能双重抑制两类宿主血淋巴酚氧化酶（prophenoloxidase, PPO）级联激活和血细胞包囊反应，显著降低活性氧（reactive oxygen species, ROS）和活性氮（reactive nitrogen species, RNS）水平。这种跨宿主免疫抑制能力，揭示了HhNEP作为"广谱免疫抑制剂"的分子特性。

关键实验技术
研究整合了毒腺转录组测序、质谱蛋白质组分析、原核表达系统制备重组HhNEP，以及宿主血淋巴PPO活性检测、血细胞免疫反应观察等技术。实验样本包括实验室长期饲养的P. interpunctella种群和新引入的S. litura幼虫。

主要研究结果

1. 寄生能力验证：H. hebetor对S. litura 3-5龄幼虫的寄生率达56.67%-63.33%，但效率低于其传统宿主P. interpunctella。
2. 分子特征解析：HhNEP含771个氨基酸，具有保守M13肽酶活性域，无信号肽但含跨膜结构，通过非经典途径分泌。
3. 免疫抑制功能：重组HhNEP使S. litura和P. interpunctella血淋巴PPO活性分别降低41.67%和35.29%，包囊率下降50%以上，ROS/RNS水平显著抑制。

结论与意义
该研究首次证实HhNEP通过同时靶向昆虫免疫的体液（PPO系统）和细胞（血细胞包囊）防御途径，实现跨宿主免疫抑制。其作用机制可能涉及降解免疫调控肽（如神经肽），这与NEP家族在神经信号调控中的进化功能相呼应。研究不仅为理解寄生蜂-宿主协同进化提供新视角，其揭示的HhNEP多重免疫抑制特性，更为开发新型害虫生物防治剂奠定了分子基础。作者团队特别指出，这种"一石多鸟"的免疫抑制策略，或可解释H. hebetor广谱寄生能力的进化优势。