靶向线粒体的抗GD2免疫脂质体递送2-甲氧基雌二醇治疗神经母细胞瘤的研究

为解决2-甲氧基雌二醇(2-ME)水溶性差、稳定性低及靶向性不足的问题，桂林医学院团队开发了抗GD2与(Fx,r)3肽双修饰的线粒体靶向免疫脂质体(2-ME/aGD2-F-ILN)。该载体显著提升2-ME的细胞毒性（IC50降低5.2倍），通过调控Bcl-2/Bax/caspase通路促进肿瘤细胞凋亡，并在体内实验中显示强效抑瘤作用，为神经母细胞瘤的精准治疗提供新策略。

　　

神经母细胞瘤是儿童最常见的颅外实体肿瘤，尽管现有疗法不断进步，但高危患者的生存率仍不理想。2-甲氧基雌二醇(2-ME)作为一种天然雌激素代谢物，通过诱导线粒体途径的细胞凋亡显示出广谱抗肿瘤活性，但其临床应用面临三大瓶颈：水溶性极差导致生物利用度低、生理环境下稳定性不足、缺乏肿瘤特异性靶向性。这些缺陷不仅限制药效发挥，还可能因脱靶效应损伤正常组织。如何让2-ME精准抵达肿瘤细胞并进一步富集于其线粒体，成为突破疗效瓶颈的关键科学问题。

桂林医学院与俄亥俄州立大学的研究团队创新性地设计了一种"双靶向"免疫脂质体系统。该系统通过抗GD2抗体（靶向神经母细胞瘤高表达的GD2抗原）和(Fx,r)₃肽（穿透线粒体膜）的协同作用，实现了从肿瘤组织到细胞线粒体的级联靶向。相关成果发表于《Cancer Nanotechnology》，为联合免疫治疗与靶向化疗提供了新思路。

研究采用薄膜分散法制备脂质体，通过透射电镜(TEM)和动态光散射(DLS)表征理化性质，JC-1染色评估线粒体膜电位，流式细胞术检测细胞凋亡，Western blot分析凋亡相关蛋白表达，并建立SH-SY5Y荷瘤小鼠模型进行体内药效评价。

理化性质分析
制备的2-ME/aGD2-F-ILN呈规则球形，粒径141.0±4.8 nm，PDI 0.186±0.01，zeta电位+24.5 mV，包封率达87.7%。

体外释放显示48小时累积释放82.6%，显著优于游离2-ME的快速释放特性。

细胞水平验证
JC-1染色显示2-ME/aGD2-F-ILN处理组绿色荧光最强，表明其能显著降低线粒体膜电位（ΔΨm）。

对SH-SY5Y细胞的IC₅₀为0.34 μg/mL，较游离2-ME提升5.2倍。Western blot证实该制剂可显著上调Bax/caspase-3/9表达，下调Bcl-2，激活线粒体凋亡通路。

体内靶向与疗效
DiR标记实验显示，aGD2-F-ILN在肿瘤部位的荧光强度是游离DiR的2.8倍。

治疗21天后，2-ME/aGD2-F-ILN组肿瘤体积仅为初始的0.68倍，且未引起明显体重下降，H&E染色显示广泛肿瘤细胞坏死。

该研究通过"EPR效应-抗原抗体结合-线粒体穿透"的三级递送策略，成功解决了2-ME的临床应用障碍。双修饰脂质体不仅提高了药物在肿瘤组织的蓄积效率，更通过线粒体靶向放大了2-ME的药理作用，为开发基于细胞器靶向的联合治疗方案提供了范式。未来研究可进一步探索该平台在其它GD2阳性肿瘤（如黑色素瘤、骨肉瘤）中的应用潜力。