新城疫病毒V蛋白与EFTUD2互作通过调控MDA5通路剪接效率抑制病毒复制的机制研究

本研究针对新城疫病毒(NDV)免疫逃逸机制，通过免疫沉淀-质谱(IP-MS)技术鉴定出剪接体核心组分EFTUD2与NDV V蛋白互作。研究发现EFTUD2通过增强鸡MDA5(chMDA5)前体mRNA剪接效率，上调干扰素β(IFN-β)和干扰素刺激基因(ISGs)表达，从而抑制NDV复制，揭示了剪接体调控天然免疫的新机制，为抗病毒药物研发提供新靶点。

　　

新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)作为危害全球禽类养殖业的重要病原体，其V蛋白已被证实是关键的免疫逃逸因子。尽管已知V蛋白能通过降解MAVS等途径抑制I型干扰素产生，但其与宿主剪接体组分的互作机制仍属空白。这一科学问题的破解，对于理解病毒与宿主在转录后调控层面的博弈具有重要意义。中国农业科学院的研究团队在《Poultry Science》发表的研究，首次揭示了NDV V蛋白与U5 snRNP核心组分EFTUD2的相互作用机制及其对抗病毒天然免疫的调控作用。

研究采用免疫沉淀-质谱(IP-MS)筛选V蛋白互作组，通过共免疫沉淀(Co-IP)和共聚焦显微镜验证EFTUD2-V互作，并构建系列截短体定位互作区域(116-825aa)。功能实验显示EFTUD2过表达可提升chMDA5剪接效率，上调ISGs和IFN-β表达，从而抑制NDV复制；而siRNA敲降则促进病毒增殖。值得注意的是，这种调控具有NDV感染依赖性，提示V蛋白可能激活EFTUD2的剪接功能。

研究结果部分：

1. 生物信息学分析：通过IP-MS鉴定出EFTUD2等146个V蛋白互作蛋白，GO分析显示这些蛋白富集于mRNA加工等通路。
2. 互作验证：Co-IP证实V与内源/外源EFTUD2结合，共聚焦显示二者胞质共定位，截短实验确定关键互作域为116-825aa（包含GTP结合域）。
3. 抗病毒功能：过表达EFTUD2使NDV NP mRNA降低2.5倍，病毒滴度下降10² TCID₅₀；而敲降使HN蛋白表达增加3倍。
4. 免疫调控机制：EFTUD2通过提升chMDA5成熟mRNA/前体mRNA比值（从1.8增至3.2），激活MDA5/IFN-β通路，且该效应需NDV感染或V蛋白共表达。
5. 特异性验证：ISG12/15等基因剪接效率同样受EFTUD2调控，证实其广谱剪接调控功能。

讨论部分指出，该研究首次阐明NDV通过V蛋白"劫持"剪接体组分EFTUD2的双面性：一方面病毒可能利用该互作干扰宿主mRNA加工；另一方面宿主通过EFTUD2增强抗病毒基因剪接来反击。这种"分子军备竞赛"为理解RNA病毒与宿主的共进化提供了新视角。特别值得注意的是，EFTUD2对chMDA5的调控具有感染依赖性，这与HCV中观察到的Eftud2抑制现象形成鲜明对比，暗示不同病毒可能演化出截然相反的剪接体调控策略。

该研究的创新性在于：① 发现剪接体组分调控RLR通路的新机制；② 揭示NDV V蛋白与宿主互作网络的新靶点；③ 提出"病毒依赖性剪接激活"新概念。这些发现不仅为禽类抗病育种提供分子标记，也为开发靶向病毒-剪接体互作的广谱抗病毒药物开辟了新途径。未来研究可进一步探索其他副黏病毒是否具有类似机制，以及EFTUD2基因编辑禽类对NDV的抵抗能力。