大麻素暴露对人类KGN颗粒细胞雌二醇生物合成无显著影响：揭示卵巢内分泌调控的新视角

随着全球大麻使用率上升，其对女性生殖内分泌的影响尚不明确且存在争议。本研究针对大麻主要活性成分THC和CBD能否直接调控人颗粒细胞雌二醇（E2）分泌这一关键问题，通过KGN细胞模型结合PKs通路激活实验，发现二者均不改变基础或FSK/PMA/SC79刺激下的E2分泌及CYP19A1表达，提示大麻对卵巢功能的干扰可能通过HPG轴等其他途径实现，为生殖毒理学研究提供了重要证据。

　　

在全球大麻合法化浪潮下，20-24岁女性使用率显著攀升，这一群体恰好处于生育力高峰阶段。然而，大麻对女性生殖健康的潜在威胁仍笼罩在迷雾中——既有研究显示其可能导致无排卵、卵泡期延长等生育障碍，但具体作用机制存在巨大争议。尤其令人困惑的是，作为卵巢雌激素"工厂"的颗粒细胞是否直接受大麻素调控，学界长期缺乏明确答案。这种认知空白使得临床无法准确评估大麻对女性生殖系统的风险，也阻碍了针对性干预措施的开发。

加拿大渥太华大学的研究团队在《Reproductive Toxicology》发表的研究，首次系统评估了大麻主要活性成分Δ⁹-THC和CBD对人类颗粒细胞雌二醇合成的直接影响。研究者采用KGN细胞系（保留FSHR和芳香化酶活性的经典模型），通过RNA-seq元分析确认内源性大麻素系统（ECS）组分表达谱后，设计了三重实验体系：采用20μM THC/CBD（覆盖典型使用者血浆浓度上限）处理细胞，同步激活PKA（FSK）、PKB（SC79）、PKC（PMA）三条关键类固醇生成通路，通过ELISA检测培养基E₂浓度，并采用RT-qPCR分析StAR（类固醇生成急性调节蛋白）和CYP19A1（芳香化酶编码基因）表达变化。

3.1 KGN细胞中的ECS表达特征
RNA-seq元分析揭示该细胞系低表达经典大麻素受体CNR1/2，但显著表达非经典受体TRPV1-4、GPR55及代谢酶NAPEPLD（催化内源性大麻素AEA合成）、DAGLA/B（生成2-AG）等，证实其具备完整的ECS分子机器。

3.2 雌二醇分泌不受干扰
在含雄烯二酮（E₂合成底物）的培养基中，FSK使E₂分泌增加3倍（p<0.05），但THC/CBD无论单独或联合激酶激活剂处理，均未显著改变基础或刺激状态下的E₂水平。

3.3 类固醇生成基因表达稳定
FSK显著上调StAR（4倍）和CYP19A1（6倍）表达（p<0.01），而THC/CBD处理组与对照无统计学差异，从转录水平验证了分泌实验结果。

这项研究首次明确：虽然KGN颗粒细胞表达功能性ECS组分，但植物源性大麻素并不通过直接调控芳香化酶活性或胆固醇转运来干扰E₂合成。这一发现具有双重突破性——既澄清了既往使用合成大麻素受体激动剂（如ACEA/JWH133）的研究结论可能高估了天然大麻素的作用，又将研究视角转向更可能的机制：大麻对女性生殖内分泌的影响或许通过下丘脑（抑制GnRH）或卵巢膜细胞等间接途径实现。研究采用的"多激酶通路激活+双终点检测"策略，为后续环境污染物生殖毒性研究提供了方法论范本。不过，作者也指出体外实验的局限性：KGN细胞仅模拟排卵前颗粒细胞，且未考虑月经周期不同阶段的激素波动影响。这些发现为大麻使用者的临床咨询提供了重要依据，同时提示未来研究需聚焦HPG轴调控和卵巢内细胞间对话机制。