综述：反义寡核苷酸作为兼具直接和间接抗病毒作用的药物

这篇综述系统阐述了反义寡核苷酸（ASO）在抗病毒治疗中的双重作用机制，涵盖其通过RNase H依赖的RNA切割、空间位阻（steric blocker）及剪接调控等模式靶向HBV、HCV和流感病毒等病原体的研究进展。文章重点分析了化学修饰（如PMO、LNA）对ASO稳定性和效力的提升，并展望了以bepirovirsen为代表的HBV靶向ASO在实现功能性治愈（HBsAg清除）中的临床潜力。

　　

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Introduction:
反义寡核苷酸（ASO）药物的发展已历时近半个世纪，其通过沃森-克里克碱基配对特异性结合病毒RNA的特性，为抗病毒治疗提供了高度可编程的平台。这类分子不仅能直接切割病毒基因组（如RNase H介导的机制），还可通过空间位阻阻断核糖体结合或调控pre-mRNA剪接间接抑制病毒复制。

Mode of action of ASOs:
ASO的作用机制呈现多样性：1）经典途径依赖RNase H切割DNA-RNA杂合双链中的RNA组分；2）作为"分子路障"（steric blocker）阻碍翻译起始或病毒蛋白组装；3）特殊设计的ASO可干预宿主或病毒mRNA的可变剪接。这种多模式特性使其对高突变病毒具有独特优势。

Chemical modifications of ASOs:
未经修饰的寡核苷酸在血清中仅维持数小时活性，化学工程成为关键突破口。磷酸骨架硫代化（PS修饰）可增强核酸酶抗性，而2'-O-甲氧乙基（MOE）和锁核酸（LNA）则大幅提升结合亲和力。值得注意的是，乙型肝炎治疗药物bepirovirsen采用的gapmer结构（中央DNA区段 flanked by LNA修饰）完美平衡了稳定性和效价。

Anti-HBV ASOs:
针对2.54亿慢性HBV感染者的临床需求，ASO疗法展现出突破性潜力。bepirovirsen的II期试验中，约9%患者实现HBsAg持续清除——这一"功能性治愈"指标远超现有核苷类似物（如替诺福韦）的疗效。其机制涉及同时靶向HBV mRNA和多聚腺苷酸化信号，显著降低病毒抗原负荷。

Anti-HCV ASOs:
虽然直接抗病毒药物（DAA）已成为丙肝标准疗法，早期ASO研究仍为组合策略奠定基础。有趣的是，调控宿主miRNA（如miR-122）的ASO显示出间接抗HCV效应，这提示ASO在宿主因子靶向领域的独特价值。

Anti-respiratory virus ASOs
流感ASO药物radavirsen（AVI-7100）作为首个进入临床试验的呼吸道病毒靶向PMO（吗啉代寡核苷酸），通过阻断基质蛋白mRNA核输出抑制病毒组装。其吸入给药方式为肺递送技术提供了重要范本。

Summary and perspective:
尽管已有11种ASO药物获批，挑战仍存：肝外递送效率、免疫刺激调控和成本控制亟待突破。未来研究或将聚焦非肝靶向递送系统（如GalNAc-ASO偶联物）和人工智能驱动的序列设计，进一步释放这类"基因剪刀"的 therapeutic potential。