脯氨酸通过Nrf2/HO-1/p65通路缓解中华鳖冬眠应激性肠道损伤的机制研究

本研究针对中华鳖（Pelodiscus sinensis）冬眠后肠道屏障功能障碍问题，通过补充脯氨酸（Pro）探究其修复机制。研究发现Pro通过激活Nrf2/HO-1通路抑制NF-κB p65磷酸化，减轻炎症和细胞凋亡，改善肠道紧密连接功能，为水产养殖中冬眠应激的营养干预提供了新策略。

　　

中华鳖作为东亚地区重要的水产养殖物种，其冬眠期间的生理变化一直是研究热点。当环境温度低于12°C时，中华鳖会进入冬眠状态，伴随代谢抑制和氧化应激加剧。冬眠后肠道功能恢复过程中，线粒体呼吸增强导致活性氧（ROS）大量积累，引发肠道屏障损伤，表现为绒毛缩短、隐窝变浅和黏膜层破坏。这种损伤直接影响了中华鳖的摄食恢复和疾病抵抗力，成为制约养殖业发展的瓶颈问题。

为解决这一难题，浙江万里大学的研究团队在《Aquaculture》发表论文，探究了脯氨酸（Pro）对冬眠后肠道损伤的修复作用及其分子机制。研究通过模拟冬眠实验，对比了常规饲料与Pro补充饲料对中华鳖肠道形态、黏膜屏障和信号通路的影响。

关键技术方法
研究采用4周模拟冬眠后4周喂养实验，设置对照组（Con）和Pro组；通过组织学分析（绒毛高度/隐窝深度比）、TUNEL免疫组化检测细胞凋亡；qPCR和Western blot检测紧密连接蛋白（ZO-1、Claudin-1/3）、炎症因子及Nrf2/HO-1/NF-κB p65通路关键蛋白表达。

研究结果

1. 生长性能与肠道形态：Pro组显著提高摄食量，增加绒毛高度和隐窝深度比，促进杯状细胞从II/III型向I型转化。
2. 屏障功能基因：Pro上调黏蛋白Muc-2和紧密连接蛋白（ZO-1、Claudin-1/3）表达，抑制肌球蛋白轻链激酶（MLCK）。
3. 凋亡与炎症：Pro减少晚期凋亡细胞数量，降低促凋亡（Bax/Caspase-3）和促炎因子（TNF-α/IL-1β）表达。
4. 分子机制：Pro激活核因子E2相关因子2（Nrf2）核转位，诱导血红素氧合酶1（HO-1）表达，进而抑制NF-κB p65磷酸化。

结论与意义
该研究首次阐明Pro通过Nrf2/HO-1/NF-κB p65轴缓解冬眠应激性肠道损伤的机制：Pro通过抗氧化通路抑制炎症和凋亡，修复紧密连接，最终恢复屏障功能。这一发现不仅为水产养殖中冬眠管理的营养干预提供了理论依据，也为其他动物应激性肠病的治疗策略开发提供了新思路。研究团队提出的Pro补充方案具有成本低、安全性高的特点，有望成为中华鳖健康养殖的关键技术之一。