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越南虹鳟鱼Weissella tructae感染的首次发现:病原特性、致病力及抗菌敏感性研究
【字体: 大 中 小 】 时间:2025年06月25日 来源:Aquaculture Reports 3.2
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推荐:本研究针对越南北部虹鳟鱼养殖场爆发的Weissellosis(韦氏菌病),首次鉴定病原体为Weissella tructae,揭示其高致病性(LD50=1.2×104 CFU/鱼)及组织损伤特征,并评估了8种抗生素的敏感性(如阿莫西林MIC低至0.06 mg/L)。该研究填补了东南亚地区该新发跨境疾病的空白,为防控策略提供关键依据。
虹鳟鱼(Oncorhynchus mykiss)作为全球广泛引进的经济鱼种,其养殖业正面临一种新兴威胁——Weissellosis(韦氏菌病)。该病由Weissella属细菌引发,最初在鲸类中发现,近年来在巴西、日本等多国虹鳟鱼中暴发,死亡率高达80%。2023年夏季,越南最大的虹鳟鱼养殖区——北部山区省份Lao Cai的25个养殖场突发疫情,水温17.2-19.5℃条件下,20%-60%的鱼群在4-5天内死亡,病鱼呈现眼球突出、内脏出血等典型症状。这种跨境传播的疾病不仅造成重大经济损失,更因缺乏病原体特性、抗生素敏感性等基础数据,使得防控陷入困境。
为应对这一挑战,越南国立大学农业学院渔业系的研究团队开展了越南首例Weissellosis系统性研究。通过对106尾病鱼样本的病原分离、16S rRNA测序和挑战实验,首次确认越南疫情由Weissella tructae引发,其与鲸源W. ceti的16S rRNA相似度达99.45%,但通过生化特征和系统发育分析支持其为独立物种。研究还发现该菌对35-40g虹鳟鱼的半数致死剂量(LD50)为1.2×104 CFU/尾,组织病理学显示脑、脾、肾等器官严重充血和炎症浸润。在抗生素筛选中,阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸和红霉素表现出最佳抑菌效果(MIC 0.06-1 mg/L),而磺胺甲恶唑/甲氧苄啶则完全无效(MIC≥512 mg/L)。这项发表于《Aquaculture Reports》的研究,不仅首次绘制了东南亚地区Weissellosis的流行病学图谱,更为跨境病原监测和精准用药提供了科学依据。
关键技术方法包括:从25个养殖场的106尾病鱼中分离细菌;通过API 20 STREP试剂盒和16S rRNA测序(引物27F/1525R)鉴定病原;采用梯度浓度(102-107 CFU/尾)腹腔注射测定LD50;组织病理学分析脑、脾等5个器官病变;CLSI M45标准下的微量肉汤稀释法测定8种抗生素MIC值。
研究结果:
3.1 疾病暴发特征:疫情集中发生于共享水源的流动养殖系统,病鱼出现眼球全层炎(panophthalmitis)和内脏出血,肝脾肿大等典型病变。
3.2 细菌分离与表型鉴定:所有分离株为革兰阳性不规则短链杆菌,TSA血琼脂上呈α-溶血,生化特征与日本虹鳟源菌株高度一致。
3.3 分子鉴定:16S rRNA序列(GenBank PV203440-43)与W. tructae标准株100%匹配,双重复合PCR同时扩增出属特异性725bp和种特异性500bp片段。
3.4 攻毒实验:107 CFU/尾剂量组14天内死亡率达100%,病理变化与自然感染一致。
3.5 组织病理学:肾脏显示肾小球坏死,肝脏血窦扩张,脾脏含铁血黄素沉积,脑部可见细菌定植。
3.6 药敏试验:阿莫西林(MIC50=0.5 mg/L)和红霉素(MIC50=0.25 mg/L)最有效,而磺胺类完全耐药。
讨论部分指出,本研究揭示了W. tructae作为越南虹鳟鱼新发病原的强致病性,其通过共享水源传播的特性对流动养殖系统构成重大威胁。尽管与鲸源W. ceti高度相似,但多相分类研究支持其独立物种地位。值得注意的是,磺胺类药物的天然耐药现象与其它Weissella物种研究一致,提示临床应避免使用。作者强调,鉴于虹鳟鱼胚胎的国际流通,需加强跨境检疫;同时呼吁开发快速分子检测技术(如针对毒力基因的qPCR)和疫苗,以减少抗生素滥用。该研究为东南亚水产养殖业的生物安全防控提供了里程碑式的基础数据。
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