EGFR-TKIs通过PI3K/AKT/SP1/C1GALT1通路抑制MUC1糖基化增强TnMUC1 CAR-T疗法在EGFR突变型NSCLC中的疗效

本研究推荐：针对EGFR突变型非小细胞肺癌（NSCLC）患者对EGFR-TKIs（表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂）的耐药性问题，中山大学团队发现EGFR-TKIs通过抑制PI3K/AKT/SP1通路下调C1GALT1（核心1β1,3-半乳糖基转移酶1），减少MUC1糖基化并暴露肿瘤特异性TnMUC1抗原，显著增强CAR-T细胞对肿瘤的识别与杀伤。该研究为靶向治疗与免疫治疗的联合策略提供了新机制，发表于《Cell Reports Medicine》。

　　

肺癌治疗领域近年来面临一个关键矛盾：虽然EGFR-TKIs能有效抑制EGFR突变型非小细胞肺癌（NSCLC）的生长，但60%-70%的客观缓解率背后仍存在原发性耐药和获得性耐药问题。更棘手的是，这类"冷肿瘤"对免疫检查点抑制剂反应不佳，传统化疗联合方案又伴随显著毒性。中山大学的研究团队独辟蹊径，将目光投向肿瘤特异性抗原TnMUC1——这个因异常糖基化而暴露在癌细胞表面的"分子标签"，探索其与EGFR靶向治疗的协同机制。

该研究由中山大学孙逸仙纪念医院的Herui Yao团队主导，发现EGFR-TKIs（如奥希替尼）不仅能直接抑制肿瘤生长，还能重塑肿瘤抗原格局。通过下调PI3K/AKT/SP1信号轴，药物显著抑制糖基转移酶C1GALT1的表达，导致MUC1蛋白糖链缩短，使更多Tn抗原表位暴露。这种"抗原去伪装"效应使CAR-T细胞对肿瘤的识别效率提升3倍以上，在PDX模型中实现近完全缓解。研究创新性地将靶向药物重新定位为"免疫增敏剂"，相关成果发表于《Cell Reports Medicine》。

关键技术包括：1）建立EGFR突变型NSCLC细胞系（PC9/HCC827）和奥希替尼耐药模型；2）使用患者来源异种移植（PDX）模型验证疗效；3）流式细胞术定量TnMUC1抗原表达；4）LC-MS/MS分析O-糖基化修饰；5）双荧光素酶报告基因和染色质免疫沉淀（ChIP）解析SP1对C1GALT1的转录调控。

EGFR TKIs与TnMUC1 CAR-T联合实现肿瘤抑制
临床样本免疫组化显示EGFR突变型NSCLC普遍存在TnMUC1低表达（图1A-B）。通过构建CDX和PDX模型，发现奥希替尼联合CAR-T治疗使肿瘤体积缩小75%以上（图1E-H），且能克服获得性耐药（图S4B-C）。安全性评估显示联合方案未引起显著器官毒性（图S5）。

EGFR TKIs增强CAR-T细胞毒性
共培养实验证实，奥希替尼处理使CAR-T细胞分泌的IFN-γ增加4倍（图2I），颗粒酶B释放增强（图2J），同时降低TGF-β等免疫抑制因子（图S6E-F）。值得注意的是，8小时短时处理中药物本身不直接杀伤肿瘤细胞（图2C-F），说明疗效增强主要源于免疫效应。

糖基化调控机制解析
奥希替尼使MUC1糖基化水平降低（图3K），hMUC1表达增加2倍（图3L-M），而全长MUC1 mRNA仅上调1.5-4倍（图3J），证实糖基化修饰而非转录水平改变是关键。单细胞测序显示药物处理后O-糖基化相关基因（MORGs）评分显著下降（图3N），LC-MS检测到Ser/Thr位点GalNAc修饰增加（图S7C）。

C1GALT1的核心调控作用
在MUC1的O-糖基化通路中（图4A），C1GALT1是唯一被奥希替尼下调>80%的糖基转移酶（图4B）。机制上，PI3K/AKT（非MAPK）通路抑制剂可模拟该效应（图4G），SP1过表达能完全逆转C1GALT1抑制（图5D-G）。ChIP实验证实SP1直接结合C1GALT1启动子（图5J），而药物处理使结合减少60%。

临床转化潜力
抗真菌药伊曲康唑作为C1GALT1抑制剂，可独立于EGFR状态增强TnMUC1表达（图6D-I），三联方案（奥希替尼+伊曲康唑+CAR-T）在动物模型中实现近乎完全的肿瘤清除（图6L-M）。

这项研究突破了传统联合疗法的思维局限，揭示EGFR-TKIs通过表观遗传调控"武装"免疫细胞的新功能。特别值得注意的是，该方案规避了ICI联合的肝毒性风险，为EGFR突变型NSCLC提供了兼具安全性（无显著器官损伤）和有效性（克服耐药）的治疗蓝图。从更广泛的视角看，PI3K/AKT通路在多种癌种中的高频激活，暗示C1GALT1抑制策略可能在乳腺癌、头颈癌等MUC1高表达肿瘤中具有普适价值。未来研究需在免疫健全模型中验证长期疗效，并探索其他糖基转移酶调节剂的协同潜力。