内源性醛类通过共价蛋白修饰放大对乙酰氨基酚肝毒性的机制研究

本研究针对对乙酰氨基酚（APAP）肝毒性机制未完全阐明的问题，通过系统分析APAP诱导的内源性醛类及其蛋白加合物，揭示了47种醛类通过共价修饰肝脏蛋白加剧肝损伤的“叠加效应”。研究发现抑制CYP2E1或激活ALDH2可显著减轻损伤，为靶向醛类代谢治疗药物性肝损伤提供了新策略。

　　

对乙酰氨基酚（APAP）作为常用解热镇痛药，其过量使用导致的肝毒性是欧美国家急性肝衰竭的首要病因。尽管已知APAP经CYP2E1代谢生成的NAPQI会引发谷胱甘肽耗竭和蛋白加合，但肝损伤的放大机制仍存疑。近年研究发现，内源性醛类可能通过类似NAPQI的共价修饰作用加剧肝损伤，但具体醛类谱系及其协同效应尚未阐明。

为系统解析这一问题，来自中国的研究团队通过溴同位素标记LC-MS技术，首次在APAP处理的小鼠肝脏中鉴定出74种游离内源性醛类，其中47种可形成蛋白加合物，29种为肝脏中新发现的醛类。关键实验技术包括：基于5-溴噻吩-2-碳酰肼的醛类标记策略、CYP2E1抑制剂4-甲基吡唑（4-MP）干预、ALDH2激活剂Alda-1和亲核捕获剂N-乙酰-L-赖氨酸（NAL）处理，以及JNK磷酸化检测。

Identification of the free and protein-adduct from endogenous aldehydes in liver
研究发现APAP给药后2-3小时，29种醛类蛋白加合物达到峰值。通过CYP2E1抑制剂4-MP干预，证实醛类生成依赖APAP代谢活化。典型醛类如4-HNE、乙二醛等通过质谱特征峰（如m/z 79/81的Br同位素双峰）被精准鉴定。

Discussion
研究揭示醛类通过三重机制加剧肝损伤：一是直接共价修饰关键功能蛋白；二是激活JNK信号通路；三是多醛类协同的“叠加效应”。ALDH2激活剂Alda-1和亲核试剂NAL可显著降低蛋白加合水平，同时缓解肝损伤标志物ALT/AST升高。

Conclusions
该研究首次建立APAP肝毒性与内源性醛类谱的关联，证明多醛类通过共价蛋白修饰的协同作用放大肝损伤。靶向醛类代谢（如ALDH2激活）或直接中和醛基的策略，为突破当前仅依赖N-乙酰半胱氨酸的治疗局限提供了新方向。

这项发表于《Chemico-Biological Interactions》的研究，由Chao Fang、Fuguo Shi等学者合作完成，不仅深化了对APAP肝毒性机制的理解，更为药物性肝损伤的精准防治提供了理论依据。研究特别强调，相较于单一醛类（如4-HNE）的既往研究，多醛类协同效应可能是临床肝损伤程度差异的重要决定因素。