TGF-β诱导的JunB-HBZ核转位是HTLV-1介导白血病发生的关键驱动机制

本研究揭示了人类T细胞白血病病毒1型（HTLV-1）编码的HBZ蛋白通过TGF-β信号通路发生核转位的分子机制，发现JunB-pSmad3复合物介导的HBZ核定位是成人T细胞白血病-淋巴瘤（ATL）特异性致癌特征。这一发现不仅阐明了病毒致癌基因在恶性转化中的时空动态调控，更为靶向TGF-β/JunB/HBZ轴治疗ATL提供了新策略。

　　

Significance
病毒致癌机制研究领域取得重要突破，人类T细胞白血病病毒1型（HTLV-1）引起的成人T细胞白血病-淋巴瘤（ATL）中，病毒基因HBZ的核质穿梭行为被证明是恶性转化的关键开关。研究首次揭示TGF-β刺激能特异性诱导ATL细胞（而非无症状携带者细胞）中HBZ蛋白的核转位，这一过程依赖于细胞转录因子JunB与pSmad3形成的复合物。更引人注目的是，JunB被证实是维持ATL细胞增殖的核心调控因子，其缺失会导致白血病细胞凋亡，但对正常感染细胞无影响。这些发现为区分恶性与非恶性HTLV-1感染细胞提供了分子标志，也为病毒致癌理论提供了新见解。

Abstract
作为HTLV-1病毒唯一在所有ATL病例中持续表达的基因，HBZ的致癌机制一直存在未解之谜。尽管已知HBZ蛋白在细胞核与胞质中均有分布，但其动态定位的调控机制与肿瘤发生的关系尚未阐明。通过创新性应用邻近连接实验（PLA），研究者发现新鲜ATL细胞中HBZ核定位比例显著高于携带者。更关键的是，TGF-β激活能诱导ATL患者（而非携带者）细胞中HBZ从胞质向核内转运。机制研究表明，细胞转录因子JunB和pSmad3与HBZ相互作用，在TGF-β刺激下共同促进其核转位。基因敲除实验证实，JUNB缺失会抑制ATL细胞（而非非白血病感染细胞）的体外/体内增殖并诱导凋亡。这些发现确立了TGF-β诱导的HBZ-JunB复合物核转位在ATL致癌中的核心地位。

Results

HBZ核定位的疾病特异性
通过PLA技术定量分析发现，ATL细胞系（MT-1、ATL43T⁺等）中HBZ核定位比例（约60%）显著高于HTLV-1感染的非白血病细胞系（MT-4、ATL6等）。在10例ATL患者原代细胞中，HBZ呈现核质共定位且核内占优，而6例携带者样本则显示胞质优势分布。这种差异提示HBZ核定位与疾病进展密切相关。

TGF-β诱导的核转位现象
在ATL细胞系TL-Om1中，TGF-β处理使HBZ核定位比例从40%提升至65%，免疫印迹证实核内HBZ蛋白量增加。这种效应在ED、ATL43T⁺等ATL细胞系和多数患者原代细胞中重现，但在非白血病细胞系ATL6/ATL7和携带者细胞中完全缺失。值得注意的是，当一名携带者进展为冒烟型ATL时，其细胞获得TGF-β诱导的HBZ核转位能力，暗示该现象是恶性转化的早期事件。

JunB-pSmad3的调控网络
RNA-seq显示TGF-β刺激2小时即可使ATL细胞中JUNB表达显著上调（非白血病细胞无响应），ChIP-seq证实pSmad3直接结合JUNB启动子。PLA实验捕捉到HBZ-JunB复合物在TGF-β刺激后向核内富集的过程，而shRNA敲除JUNB或SMAD3均阻断HBZ核转位。特别有趣的是，虽然HBZ也能结合JunD，但该复合物不参与转位调控，凸显JunB的特异性作用。

JunB的致癌功能
在ATL细胞系ED和MT-1中，JUNB敲除导致增殖抑制和凋亡增加（通过上调促凋亡基因BCL2L11），但对非白血病细胞无影响。整合RNA-seq与ChIP-seq数据鉴定出63个JunB直接调控的ATL特异性靶基因，包括Treg相关基因IL2RA。动物实验显示，JUNB敲除完全抑制MT-1细胞在小鼠体内的成瘤能力，使ED细胞肿瘤体积减少70%，证实其在体内致癌中的必要性。

Discussion
该研究破解了HTLV-1致癌的关键时空调控密码：TGF-β通过pSmad3诱导JUNB表达，后者与HBZ形成核转位复合物，进入核内后共同激活促增殖程序（如抑制BCL2L11、上调IL2RA）。这种正反馈环路使ATL细胞获得增殖优势，同时通过模拟Treg表型实现免疫逃逸。与HPV-E6/EBV-LMP1等病毒癌蛋白相比，HBZ的核质穿梭调控展现出独特的致癌模式。该发现不仅为ATL治疗提供新靶点（如靶向JunB-HBZ相互作用界面），更为理解病毒蛋白亚细胞定位的动态调控树立了新范式。

Materials and Methods
研究采用前沿技术组合：通过PLA实现单细胞水平HBZ定位定量；利用CyTOF质谱流式检测ATL细胞TGF-β1蛋白表达；结合RNA-seq和ChIP-seq解析JunB调控网络；建立NSG小鼠模型验证JUNB的体内功能。临床样本分析严格遵循伦理规范，所有实验均设置生物学重复并进行统计效力验证。