微囊化支架联合α-酮戊二酸佐剂口服疫苗对尼罗罗非鱼爱德华氏菌病的免疫保护效应研究

本研究针对水产养殖中爱德华氏菌(Edwardsiellatarda)引发的细菌性疾病，开发了基于壳聚糖-海藻酸盐微囊化支架搭载α-Ketoglutarate(AKG)佐剂的口服疫苗。通过FTIR和SEM表征材料特性，证实该疫苗能显著提升尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的溶菌酶、髓过氧化物酶及IgM抗体水平(P<0.05)，攻毒实验显示64.44%的存活率，为水产疫苗无应激投喂提供了新策略。

　　

水产养殖业正面临爱德华氏菌(Edwardsiellatarda)的严重威胁，这种病原体不仅导致鱼类出现螺旋式游动等异常行为，更造成养殖场大规模死亡。传统抗生素治疗加剧了耐药性和水污染，而注射疫苗虽有效却存在操作繁琐、引发应激等问题。在此背景下，科钦科技大学的研究团队创新性地将生物材料技术与免疫学相结合，开发出基于壳聚糖(chitosan)-海藻酸盐(alginate)微囊化支架的口服疫苗，相关成果发表在《Fish》期刊。

研究采用离子凝胶法制备疫苗载体，通过傅里叶变换红外光谱(FTIR)和扫描电镜(SEM)表征材料特性。实验选用平均体重10±2g的健康尼罗罗非鱼，分为疫苗组与对照组，通过饲喂方式接种含AKG佐剂的灭活疫苗。免疫指标检测采用酶活性分析和RT-qPCR技术，攻毒实验后计算相对存活率(RPS)，并对脾脏、肾脏等组织进行病理学观察。

The experimental fish
实验选用印度MPEDA养殖场的健康罗非鱼，在水温27±3°C、pH7.2-7.4条件下驯养两周，确保水质参数符合养殖标准。

Vaccine safety test
灭活疫苗安全性验证显示无细菌生长，连续一周投喂未观察到鱼类行为异常或死亡，证实载体材料生物相容性良好。

Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR)
FTIR分析证实支架成功负载疫苗成分，特征峰显示壳聚糖的氨基(-NH₂)与海藻酸盐的羧基(-COOH)形成离子交联网络。

Discussion
疫苗组展现出显著升高的先天免疫指标：溶菌酶(lysozyme)活性提高37%，髓过氧化物酶(myeloperoxidase)增加42%，同时特异性抗体IgM在加强免疫后出现峰值。攻毒后64.44%的存活率证实AKG佐剂通过TCA循环中间体的特性增强了抗原递呈效率。

Conclusion
该研究首次将AKG作为水产疫苗佐剂，其促进氮同化的特性与生物材料缓释作用协同，使口服疫苗达到接近注射免疫的效果。组织病理学显示45天时脾脏淋巴滤泡增生，证实形成长效免疫记忆。这种无需专业操作的投喂方式，为大规模水产免疫提供了商业化应用前景。