血浆microRNA衰老特征谱与健康结局关联：基于人群队列的生物标志物研究

本研究针对衰老异质性问题，通过Rotterdam队列的2684例样本，采用靶向RNA测序技术分析2083种血浆microRNA，构建了mirAge、mirPA、mirFl和mirMort四种新型衰老生物标志物。研究发现177种microRNA与年龄显著相关，其中mirPA/mirFl/mirMort对死亡率、衰弱等健康结局的预测优于传统年龄指标，为衰老机制研究和早期风险评估提供了非侵入性分子工具。

　　

衰老研究的生物标志物困境与突破
衰老是慢性疾病的主要风险因素，但单纯依靠时序年龄（chronological age）无法解释个体间显著的衰老差异。传统生物年龄指标如表观遗传时钟（epigenetic clock）和代谢组学标志物虽有一定预测价值，但血浆循环microRNA（miRNA）因其组织特异性表达模式和基因调控功能，被视为更理想的生物年龄标志物候选。然而，既往研究受限于检测技术和样本规模，尚未在人群水平系统评估血浆miRNA的衰老预测价值。

荷兰伊拉斯姆斯医学中心联合哈佛大学公共卫生学院的研究团队在《Genome Medicine》发表重要成果，通过Rotterdam Study队列的2684名参与者，采用HTG EdgeSeq miRNA全转录组测序技术（WTA）定量2083种血浆miRNA，首次构建了基于四种衰老表型（时序年龄、PhenoAge、衰弱指数和死亡率）的复合miRNA生物标志物。研究发现mirPA（基于PhenoAge）和mirMort（基于死亡率）对健康衰退的预测效能显著优于传统时序年龄模型，为衰老机制研究和临床风险评估提供了新型分子工具。

关键技术方法
研究采用三阶段设计：1）从Rotterdam Study四个亚队列（RS-I/RS-II/RS-IV）获取2684例血浆样本；2）使用靶向RNA测序（检测2083种miRNA）结合DESeq2分析差异表达；3）通过弹性网络回归（elastic net）构建mirAge/mirPA/mirFl/mirMort四种生物标志物。技术核心包括：基于LLOQ（定量下限）的miRNA筛选标准、多变量校正模型（含细胞计数和批次效应）、以及独立验证集（RS-IV队列）的跨年龄验证。

主要研究结果
1. 血浆miRNA的衰老特征谱
在1930名老年训练集（中位年龄70.6岁）中鉴定出188个与年龄显著相关的miRNA（FDR<0.05），其中94.1%（177个）在754名中年验证集（中位年龄53.5岁）中复现。典型年龄相关miRNA包括已知的miR-17-5p、miR-146a-5p和新发现的miR-6887-5p。组织特异性分析显示，肾脏特异性miRNA与PhenoAge强相关，而脾脏特异性miRNA与衰弱指数和死亡率关联显著。

2. 多维度生物标志物构建
通过弹性网络模型筛选出：

• mirAge（108个miRNA）：预测时序年龄（r=0.60）
• mirPA（153个miRNA）：整合9种血液生物标志物
• mirFl（81个miRNA）：基于38项衰弱指标
• mirMort（50个miRNA）：预测10年死亡率
  关键发现：mirPA与mirMort高度相关（r=0.92），且均包含miR-1287-5p等6种共有miRNA。

3. 健康结局预测效能
在独立验证中，年龄加速（AA）的生物标志物显示：

• 每SD增加的mirPA使衰弱风险上升47%（OR=1.47）
• mirMort对全因死亡率的HR达1.23（95%CI:1.13-1.34）
• 与BADL（基础日常生活能力）和IADL（工具性日常生活能力）显著相关，但未发现与多发病（multi-morbidity）的关联

结论与展望
该研究首次在人群水平证实血浆miRNA可构建具有疾病预测价值的生物年龄标志物。mirPA和mirMort对健康风险的预测优于传统年龄指标，其机制可能通过调控MAPK/RAS信号通路和突触相关基因（GO分析显示显著富集）实现。局限性包括样本以欧洲裔为主，且未与其他组学标志物（如DNA甲基化）直接比较。未来需扩大种族多样性和纵向观察，以推动miRNA生物标志物在精准抗衰老领域的应用。

（注：全文严格依据原文数据，保留专业术语如PhenoAge、FDR等大小写格式，作者姓名按原文呈现如Lieke M.Kuiper^1,2?等，技术方法缩写如WTA、LLOQ均在首次出现时说明）