IFP35通过TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路加剧急性缺血性脑卒中后神经炎症的作用机制研究

本研究揭示了干扰素诱导蛋白35(IFP35)作为新型损伤相关分子模式(DAMP)在急性缺血性脑卒中中的作用机制。通过小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型，研究人员发现IFP35通过TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路加剧神经炎症和脑损伤，为缺血性卒中治疗提供了新的潜在靶点。

　　

脑卒中作为全球第二大死亡原因，其病理机制复杂且治疗手段有限。其中，急性缺血性脑卒中引起的神经炎症反应是加重继发性脑损伤的关键因素。近年来，损伤相关分子模式(DAMPs)在介导无菌性炎症中的作用备受关注，但关于干扰素诱导蛋白35(IFP35)这一新型DAMP在脑卒中中的作用仍属空白。徐州医科大学附属医院急诊医学研究所的Mengmeng Zhang、Bingnan Guo等研究人员在《Journal of Neuroinflammation》发表的研究，首次系统阐明了IFP35在急性缺血性脑卒中中的促炎机制。

研究采用临床样本分析、MCAO小鼠模型和体外实验相结合的方法。关键技术包括：1)收集31例卒中患者和21例健康对照血清进行ELISA检测；2)建立60分钟缺血/再灌注的MCAO小鼠模型；3)侧脑室注射IFP35 siRNA进行基因沉默；4)TLR4抑制剂TAK-242干预实验；5)免疫荧光、Western blot和免疫共沉淀等技术分析信号通路。

IFP35在急性缺血性脑卒中患者和小鼠模型中表达升高
临床样本显示卒中患者血清IFP35水平显著高于健康对照。MCAO小鼠模型中，血清和梗死周边区IFP35在缺血后3-6小时开始升高，持续至1周。免疫荧光证实IFP35主要表达于神经元(NeuN⁺细胞)，少量存在于内皮细胞(早期)和小胶质细胞(Iba1⁺)。

IFP35沉默减轻神经炎症和脑损伤
siRNA沉默IFP35显著降低IL-1β、TNF-α等促炎因子水平，减少神经元凋亡(TUNEL⁺细胞减少)和梗死体积(TTC染色)。行为学测试(Zea Longa评分、转角试验等)显示神经功能明显改善。

IFP35通过TLR4/NF-κB/NLRP3通路发挥作用
免疫共沉淀证实IFP35与TLR4直接结合，TAK-242处理减弱该相互作用。机制上，IFP35促进NF-κB p65核转位，上调NLRP3炎症小体组件(ASC、caspase-1)表达，增加成熟IL-1β分泌。体外实验证实重组IFP35蛋白可激活BV2小胶质细胞的该通路。

这项研究首次确立IFP35作为卒中相关DAMP的地位，阐明了其通过TLR4/NF-κB/NLRP3轴加剧神经炎症的分子机制。临床意义在于：1)血清IFP35可能成为早期诊断标志物；2)靶向IFP35-TLR4相互作用或下游信号分子(NLRP3抑制剂)可能成为新型治疗策略；3)为理解卒中后免疫反应提供了新视角。研究创新性地将病毒感染相关蛋白IFP35与缺血性脑损伤联系起来，拓展了对神经炎症网络的认知，为开发兼具抗炎和神经保护作用的疗法奠定基础。