三相中空纤维液相微萃取结合HPLC-DAD/MS技术同步检测人尿液、血浆及水样中他莫昔芬和克罗米芬的研究

本研究针对生物和环境样本中痕量抗雌激素药物（Tam和Clom）检测难题，开发了三相中空纤维液相微萃取（HF-LPME）结合HPLC-DAD/MS的联用技术。通过优化有机溶剂、pH和萃取时间等参数，实现了尿样、血浆及水样中2.5–100 μg L?1（DAD）和0.1–100 μg L?1（MS）的线性检测，为临床监测和环境风险评估提供高灵敏度方法。

　　

论文解读
在女性不孕症治疗和乳腺癌防治中，他莫昔芬（Tamoxifen, Tam）和克罗米芬（Clomiphene, Clom）作为关键药物，其临床应用与环境污染问题日益凸显。Tam不仅是乳腺癌治疗的“金标准”药物，还被运动员滥用作兴奋剂；而Clom在畜牧业中的非法使用导致其通过排泄物污染水源。更值得关注的是，COVID-19大流行期间，这两种靶向雌激素受体的药物被探索用于抗病毒治疗，但其潜在血栓风险与COVID-19症状叠加可能危及患者生命。然而，现有检测技术面临复杂基质干扰、灵敏度不足等问题，亟需开发高效的前处理方法。

瑞典隆德大学的研究团队创新性地将三相中空纤维液相微萃取（HF-LPME）与高效液相色谱-二极管阵列/质谱联用（HPLC-DAD/MS）技术结合，成功实现了人尿液、血浆及自然水样中痕量Tam和Clom的同步检测。相关成果发表于《Journal of Chromatography A》。

关键技术方法
研究采用Accurel Q3/2聚丙烯中空纤维膜构建三相微萃取系统，以十一烷为有机相，0.005 M NaOH为供体相，0.01 M HCl为受体相，在1000 rpm搅拌速度下萃取75分钟。通过HPLC-DAD（线性范围2.5–100 μg L^?1）和HPLC-MS（0.1–10 μg L^?1和15–100 μg L^?1）双检测系统验证，R2>0.998。实际样本检测涵盖健康人尿液、血浆及自然水体。

研究结果

1. 供体相体积优化：当供体相体积从11 mL增至100 mL时，预富集因子（PF）显著提升，证实大体积样本适用于痕量分析。
2. 有机溶剂筛选：十一烷相比正辛醇、二己醚等溶剂展现更高萃取效率，因其与聚丙烯纤维膜相容性更佳。
3. pH调控机制：碱性供体相（NaOH）促进药物分子去质子化，酸性受体相（HCl）诱导再质子化，形成pH梯度驱动转移。
4. 盐效应验证：添加NaCl至5% w/v时，离子强度增大抑制药物电离，萃取效率提升23%。
5. 实际样本检测：在加标尿液中回收率达91–104%，血浆基质中检出限低至0.03 μg L^?1（MS），自然水样中PF>180。

结论与意义
该研究通过HF-LPME技术克服了传统固相萃取（SPE）有机溶剂消耗大的缺陷，将样本处理成本降低80%。创新的三相设计使Tam/Clom跨膜传输效率提升2.1倍，结合DAD与MS双检测策略，既满足常规实验室快速筛查（DAD），又能应对复杂基质超痕量分析（MS）。临床层面，方法为乳腺癌患者用药监测和运动员兴奋剂检测提供可靠工具；环境领域，首次实现水体中ng/L级雌激素调节剂的精准溯源。隆德大学团队Yamini等人提出的技术路线，为应对药物环境污染与公共卫生安全的交叉挑战提供了范式转换。