骆驼奶细胞外囊泡共递送siVEGF/索拉非尼通过双重阻断VEGF生物学效应增强抗肝癌活性

针对肝细胞癌(HCC)治疗中VEGF旁分泌与自分泌的双重作用机制，研究人员构建了基于骆驼奶细胞外囊泡(cEVs)的共递送系统(so-cEVs-PPT/siVEGF)，通过索拉非尼阻断VEGF信号通路联合siRNA干扰肿瘤自分泌，实现VEGF生物学效应的双重阻断。该体系在小鼠模型中展现出显著抑瘤效果和低副作用，为HCC靶向治疗提供了新策略。

　　

肝癌作为全球高死亡率恶性肿瘤，传统治疗面临巨大挑战。血管内皮生长因子(VEGF)在肿瘤微环境中通过旁分泌促进血管生成，同时通过自分泌直接刺激肿瘤生长，形成"双重供养"机制。索拉非尼虽能阻断VEGF受体信号，但无法抑制肿瘤细胞自身分泌的VEGF，且存在脱靶毒性。骆驼奶细胞外囊泡(cEVs)因其天然靶向性和低免疫原性成为理想载体，但如何实现siRNA与小分子药物的高效共递送仍是难题。

中国研究人员通过Pluronic P123-聚乙烯亚胺-tLyP-1(PPT)聚合物修饰cEVs，构建了so-cEVs-PPT/siVEGF共递送系统。关键技术包括：差速离心结合尺寸排阻色谱(SEC)提取cEVs、PPT聚合物静电吸附siRNA、超声乳化装载索拉非尼，以及通过神经纤毛蛋白(NRP)靶向的tLyP-1肽增强肿瘤穿透性。

合成与表征
cEVs经纳米颗粒追踪(NanoSight)和原子力显微镜(AFM)证实粒径约200nm，透射电镜(TEM)显示典型囊泡结构。负载索拉非尼后包封率达78.3%，siVEGF压缩效率超过95%。体外释放实验显示72小时累计释放率达80%。

体外抗肿瘤效应
CCK-8实验表明so-cEVs-PPT/siVEGF对HepG2细胞的IC₅₀较单药降低3.2倍。流式细胞术显示联合组凋亡率(41.7%)显著高于单药组(17.3%)。Western blot证实VEGF蛋白表达下降76.8%，同时p-VEGFR2水平降低82.4%。

体内治疗效果
在HCC小鼠模型中，静脉注射组肿瘤抑制率达78.9%，瘤内注射组达81.3%。免疫组化显示微血管密度(MVD)降低5.4倍，TUNEL阳性细胞增加7.2倍。重要的是，主要器官未见明显毒性，ALT/AST水平与对照组无统计学差异。

讨论与结论
该研究创新性地通过cEVs天然载体实现siRNA与小分子药物的时空协同递送：tLyP-1肽介导的NRP靶向使肿瘤药物浓度提高3.7倍；PPT聚合物既保护siRNA免遭核酸酶降解，又通过抑制P-gp外排泵克服索拉非尼耐药性。双重阻断策略使VEGF信号通路抑制呈现"1+1>2"效应，为晚期HCC治疗提供了新范式。论文发表于《Journal of Controlled Release》，其构建的模块化递送平台也为其他恶性肿瘤联合治疗提供了参考。