Calycosin通过KLF15-P2X7R/NLRP3信号通路抑制肝纤维化的机制研究

本研究针对肝纤维化治疗难题，揭示了传统中药黄芪活性成分Calycosin通过上调KLF15转录因子抑制P2X7R/NLRP3炎症小体通路的新机制。实验证实Calycosin可降低TAA模型小鼠ALT/AST水平33%-35%，减少中性粒细胞胞外诱捕网形成，并通过KLF15直接结合P2X7r启动子调控HSC-巨噬细胞互作。该发现为肝纤维化靶向治疗提供了新策略。

　　

肝纤维化是慢性肝病发展为肝硬化和肝癌的关键病理阶段，其特征是细胞外基质(ECM)过度沉积替代受损肝组织。尽管已知肝星状细胞(HSC)活化是核心环节，但调控网络复杂，现有治疗手段有限。传统中药黄芪(Astragalus membranaceus)的活性成分Calycosin虽显示肝保护作用，其抗纤维化机制尚未阐明。吉林省某研究团队在《Journal of Ethnopharmacology》发表的研究，首次揭示了Calycosin通过KLF15-P2X7R/NLRP3轴抑制肝纤维化的分子机制。

研究采用硫代乙酰胺(TAA)诱导的小鼠肝纤维化模型，结合RNA测序、siRNA-KLF15转染LX-2细胞、双荧光素酶报告基因等技术。发现Calycosin治疗使血清ALT/AST降低33%-35%，显著改善肝组织病理。机制上证实KLF15直接结合P2X7r启动子，抑制NLRP3炎症小体活化，阻断HSC-巨噬细胞互作。

【Calycosin alleviating TAA-induced fibrogenesis】
TAA模型显示肝羟脯氨酸(HYP)和转氨酶显著升高，Calycosin治疗组改善明显。组织学观察到炎症浸润和纤维间隔减少，提示Calycosin抑制ECM沉积。

【KLF15-P2X7r调控机制】
RNA测序发现KLF15/NOD样受体通路关键作用。Calycosin使KLF15表达上调3倍，P2X7R蛋白下降。siRNA敲除实验证实KLF15缺失会取消Calycosin对P2X7r的抑制作用，双荧光素酶实验直接验证KLF15结合P2X7r启动子。

【巨噬细胞焦亡调控】
Calycosin通过抑制P2X7R/NLRP3通路阻断LPS/ATP诱导的骨髓源性巨噬细胞(BMDM)焦亡(pyroptosis)，条件培养基实验显示其可中断HSC-巨噬细胞恶性互作。

该研究创新性发现：1) 首次阐明KLF15通过直接调控P2X7r转录抑制肝纤维化；2) 揭示Calycosin通过KLF15-P2X7R/NLRP3轴同时靶向HSC活化和巨噬细胞焦亡的双重作用；3) 为中药活性成分治疗肝纤维化提供理论依据。不足之处在于未探讨Calycosin体内代谢特性，未来需结合临床前药代动力学研究推进转化应用。