牛结节性皮肤病病毒通过调控自噬流促进MDBK细胞复制的分子机制

针对牛结节性皮肤病病毒（LSDV）如何利用宿主自噬通路促进复制的科学问题，研究人员通过Western blot、免疫荧光及药理学干预实验，揭示LSDV通过抑制溶酶体降解（LAMP2下调）维持基础自噬水平，从而优化病毒复制。该研究为开发靶向自噬的抗LSDV策略提供了理论依据。

　　

牛结节性皮肤病（Lumpy Skin Disease, LSD）是由痘病毒科（Poxviridae）的牛结节性皮肤病病毒（LSDV）引起的一种高度传染性牛类疾病，对全球畜牧业造成重大经济损失。尽管已知LSDV可操纵宿主细胞过程，但其与自噬（autophagy）通路的相互作用机制尚不明确。自噬是细胞通过形成自噬体（autophagosome）降解受损细胞器的过程，而病毒常通过调控该通路促进自身复制。因此，解析LSDV与自噬的互作机制对理解其致病性及开发新型抗病毒策略至关重要。

中国农业科学院兽医研究所的研究团队在《Microbial Pathogenesis》发表论文，通过体外感染模型揭示了LSDV对宿主自噬流的精细调控。研究发现，LSDV并不强烈诱导自噬，而是通过抑制溶酶体降解（表现为LAMP2表达下降）干扰自噬流，从而创造利于病毒复制的细胞内环境。药理学实验证实，激活自噬（如使用雷帕霉素Rapamycin）可增强LSDV复制，而抑制自噬（如使用巴弗洛霉素Bafilomycin A1）则显著降低病毒产量。此外，灭活病毒无法模拟活病毒的调控作用，表明病毒复制活性是自噬调控的必要条件。

研究采用免疫荧光检测病毒定位、Western blot分析自噬标志物LC3B-II及溶酶体标记物LAMP2，并结合药理学干预（激活剂/抑制剂）明确自噬流对病毒复制的影响。实验使用MDBK（Mardin-Darby Bovine Kidney）细胞系及LSDV-WB/IND/19毒株。

研究结果

1. Detection of LSDV in MDBK cells by immunofluorescence assay
   免疫荧光证实LSDV感染后24小时即可在细胞质中检测到病毒，但特征性细胞病变（CPE）需传代至第4代才显现，包括细胞圆缩、空泡化等。

2. Discussion
   LSDV通过维持基础自噬水平同时抑制溶酶体降解，形成“部分阻断”的自噬流，可能为病毒提供膜结构或逃避免疫识别。LC3B-II的剂量依赖性下调提示病毒载量直接影响自噬调控强度。

3. Conclusion
   LSDV对自噬的双向调控（基础激活+溶酶体抑制）是其复制策略的核心，该发现为开发靶向宿主-病毒互作的抗LSDV药物（如自噬抑制剂）提供了新方向。

该研究首次系统阐明LSDV与自噬通路的动态互作，不仅深化了对痘病毒科致病机制的理解，也为其他病毒性疾病的治疗研究提供了范式。研究团队特别指出，针对自噬关键节点（如LC3B-II转换或LAMP2功能）的干预可能成为未来抗LSDV的重要策略。