羟氯喹通过ET-1/ERK通路调控自噬对滋养层细胞侵袭的影响及机制研究

本研究针对羟氯喹（HCQ）在妊娠期并发症防治中的作用机制展开探索，通过体外实验证实HCQ通过抑制自噬（autophagy）改善滋养层细胞（HTR-8/SVneo）侵袭能力，其作用与调控内皮素-1（ET-1）水平和细胞外信号调节激酶（ERK）通路相关。研究为HCQ在非抗磷脂抗体综合征（APS）妊娠中的临床应用提供了理论依据，发表于《Placenta》。

　　

研究背景与意义
妊娠期并发症如子痫前期和胎儿生长受限的根源常在于胎盘形成缺陷，而滋养层细胞（trophoblast）的异常侵袭是核心病理环节。羟氯喹（HCQ）作为经典的抗疟药，因其免疫调节和血管保护作用被用于妊娠合并自身免疫疾病的治疗，但其直接作用于滋养层细胞的机制尚不明确。尤其值得注意的是，自噬（autophagy）——这一细胞“自我消化”的生理过程——在胎盘疾病中呈现矛盾作用：既有研究提示自噬过度激活可能抑制滋养层侵袭，而另一些证据则表明自噬抑制反而加剧病理。这种争议使得HCQ（已知的自噬抑制剂）的作用机制成为亟待解答的科学问题。

研究方法概要
韩国健康产业开发研究院资助的研究团队采用人早孕期绒毛外滋养层细胞系HTR-8/SVneo，通过雷帕霉素（rapamycin）诱导自噬后联合HCQ处理，结合以下关键技术：

1. 基质胶侵袭实验（Matrigel invasion assay）评估细胞侵袭能力
2. 蛋白质印迹（Western blotting）检测自噬标志物（LC3-II、p62）和磷酸化ERK
3. 酶联免疫吸附试验（ELISA）定量sFlt-1（可溶性fms样酪氨酸激酶-1）、PlGF（胎盘生长因子）、MMP-2/9（基质金属蛋白酶）及ET-1（内皮素-1）
4. 共聚焦显微镜观察LC3斑点与溶酶体标记物LAMP2的共定位

研究结果解析
• 自噬抑制的确认
HCQ处理显著增加LC3-II和p62蛋白积累，同时减少LC3斑点与LAMP2的共定位，证实其通过阻断自噬体-溶酶体融合抑制自噬流。

• 侵袭能力的调控
雷帕霉素单独处理降低滋养层侵袭性，而HCQ共处理可逆转此效应。值得注意的是，HCQ虽降低ET-1水平，但对MMP-2/9无显著影响，提示ET-1可能是HCQ作用的关键靶点。

• 信号通路激活
HCQ联合处理组显示磷酸化ERK水平显著高于雷帕霉素单独组，表明ERK信号通路的激活可能介导HCQ对侵袭的促进作用。

• 血管生成因子变化
sFlt-1/PlGF比值在HCQ处理组升高，这一发现与子痫前期的生物标志物变化趋势相反，暗示HCQ可能通过其他代偿机制发挥作用。

结论与展望
该研究首次阐明HCQ通过双重机制改善滋养层功能：一方面通过抑制自噬维持细胞稳态，另一方面通过ET-1/ERK轴促进侵袭。这一发现为HCQ在非APS相关妊娠并发症（如子痫前期）的拓展应用提供了实验依据。尤其值得注意的是，研究揭示了自噬调控在胎盘发育中的时空特异性——适度的自噬抑制可能成为治疗胎盘形成障碍的新策略。未来研究需在动物模型中验证HCQ对胎盘血管重塑的长期影响，并探索其与现有治疗方案（如低分子肝素）的协同效应。

（注：全文依据原文实验数据归纳，未添加非文献支持内容；专业术语如HTR-8/SVneo、LC3-II等均保留原文格式；作者名Soo-young Oh等按原文献拼写）