多靶点酪氨酸激酶抑制剂多韦替尼与人血清白蛋白结合特性的光谱学及计算机模拟研究

本研究通过荧光光谱、圆二色谱及分子对接等技术，揭示了多韦替尼(DTB)与人血清白蛋白(HSA)的静态猝灭结合机制，证实二者通过氢键、疏水作用等形成稳定复合物，结合位点位于HSA的Sudlow's site I。该工作为优化DTB的肿瘤靶向递送及减少副作用提供了理论依据。

　　

在肿瘤精准治疗时代，受体酪氨酸激酶抑制剂(RTKs)如多韦替尼(DTB)虽展现出广谱抗肿瘤潜力，但其临床疗效受限于药物递送效率与毒副作用。DTB通过阻断FGFRs、PDGFR等信号通路抑制肿瘤增殖，但长期使用可能引发严重不良反应。药物与血清蛋白的结合特性直接影响其体内分布与疗效，而HSA作为主要药物载体，其结合机制尚未明确。

研究人员采用光谱学与计算机模拟联用策略，通过荧光滴定发现DTB使HSA荧光强度降低68%，紫外吸收出现增色效应，证实复合物形成。结合位点竞争实验显示经典位点I抑制剂华法林可置换53%的DTB。圆二色谱揭示DTB诱导HSA的α-螺旋含量从62%降至54%，提示蛋白构象改变。分子动力学模拟表明复合物在100 ns内保持稳定，RMSD值波动小于0.3 nm。

主要技术方法
实验采用荧光光谱测定结合常数(2.90–9.80×10⁴ M^?1)，同步荧光分析色氨酸微环境变化，FTIR检测二级结构改变，分子对接(Autodock Vina)预测结合位点，GROMACS进行50 ns分子动力学模拟验证稳定性。

研究结果

1. 荧光光谱与猝灭机制：静态猝灭主导过程，Stern-Volmer常数K_SV随温度升高而降低，结合位点数n≈1，ΔH=?18.24 kJ/mol表明作用力以氢键和范德华力为主。
2. 结构特征分析：FTIR显示酰胺I带位移从1653 cm^?1移至1647 cm^?1，证实α-螺旋解旋；三维荧光显示Trp-214微环境极性增强。
3. 位点竞争研究：华法林使DTB-HSA复合物荧光恢复53%，分子对接显示DTB插入IIA亚域疏水腔，与Arg-257形成氢键(2.1 ?)。

结论与意义
该研究首次阐明DTB通过中等亲和力(K_a≈10⁴ M^?1)结合HSA的分子机制，复合物稳定性由多力协同维持。发现DTB与华法林存在位点竞争，提示联合用药需调整剂量。光谱学与计算模拟的融合策略为预测药物蛋白相互作用提供了范式，发表于《Spectrochimica Acta Part A》的成果为优化RTKs类药物的递送系统设计奠定了理论基础。