全长TprC变体免疫诱导针对梅毒螺旋体重复蛋白家族表面表位的广泛应答并在兔梅毒模型中展现部分保护效果

本研究针对梅毒疫苗开发难题，通过免疫兔模型评估TprC变体、TprD2及TprK NH2端片段的效果。结果显示TprC与TprK免疫可显著减轻原发硬下疳、降低病原负荷并限制淋巴结播散，同时鉴定出保守的B细胞表位。该研究为多表位疫苗设计提供了关键靶点，推动梅毒防控策略发展。

　　

梅毒作为由苍白螺旋体(Treponema pallidum subsp. pallidum)引起的性传播疾病，全球年新增病例超800万例，尽管青霉素治疗有效，但近年来在男男性行为者(MSM)和HIV感染者中发病率持续攀升。更严峻的是，先天性梅毒病例在6年内从70万激增至150万，凸显现有防控措施的局限性。梅毒螺旋体表面抗原密度低且缺乏明确结构数据，导致疫苗开发停滞数十年。

华盛顿大学等机构的研究团队在《Vaccine》发表重要成果，通过免疫兔模型系统评估TprC变体、TprD₂及TprK NH₂端片段的保护效果。研究采用PAI-RI佐剂（含MPLA/TDM/CWS）免疫新西兰白兔，通过ELISA监测抗体滴度，结合延迟型超敏反应(DTH)评估、病变体积测量、暗视野显微镜(DFM)计数和兔感染试验(RIT)等验证保护效果，并运用噬菌体免疫沉淀测序(PhIP-Seq)和合成肽表位作图解析免疫应答特征。

3.1 免疫原性验证
ELISA显示TprC变体免疫组抗体滴度达1:1,280,000，显著高于TprK组(p=0.0006)。所有免疫组在感染后48小时均出现DTH反应，IFN-γ mRNA水平在TprC和TprK组比TprD₂组高3倍(p<0.05)，证实Th1型免疫应答的激活。

3.3 病变进展评估
TprC免疫使硬下疳体积减少62%，溃疡发生率从100%降至16%。DFM显示病变部位螺旋体负荷降低10倍，qPCR证实TP0574基因拷贝数减少85%。值得注意的是，TprD₂免疫未显示显著保护效果，强调抗原选择的关键性。

3.4 T细胞应答特征
脾细胞增殖实验发现TprC的NH₂端肽段(AA 5-277)诱导最强增殖反应，IFN-γ分泌量达450 pg/ml。TprK免疫组对保守外环2(cExL2)肽段反应强烈，印证细胞免疫在保护中的作用。

3.5 病原播散限制
RIT试验揭示TprC免疫组淋巴结转移率降为零，而TprK组仅延迟 orchitis发生时间(70.1天 vs 对照24.4天)。调理吞噬实验证实TprC抗血清使巨噬细胞吞噬率提升3倍(p<0.001)，揭示其保护机制。

3.7 表位鉴定突破
通过AlphaFold3预测的10个TprC外环中，ExL1(WGIAFQKNPRTGPGKHT)、ExL3(FVTRAYSEKDTRYAPGF)和ExL6.1(HAQTQERAILKAREVFR)被鉴定为优势表位。PhIP-Seq分析608株基因组数据，发现TprC免疫可交叉识别TprI/D/F等亚家族成员，覆盖92%临床分离株。

该研究首次证实全长TprC变体免疫能诱导针对多Tpr蛋白的交叉免疫，其保守表位WGIAFQKNPRTGPGKHT在2529株测序菌株中完全保守。尽管保护效果未达完全 sterilizing immunity（无菌免疫），但显著降低传染性病变的溃疡率与病原播散，为多表位疫苗设计奠定基础。研究同时揭示TprK的cExL2表位DYKSKGDKPVYEPGFEG可作为通用疫苗靶点，但其V3区变异可能削弱保护效果。这些发现将推动基于β-桶状支架的嵌合抗原开发，并提示需结合Th1型佐剂优化免疫策略。未来需在非人灵长类模型中验证这些表位的保护广度，并探索其与Tp0751等载体蛋白的协同效应。