常染色体隐性Bethlem肌病的30年探索：揭示COL6A2基因突变谱与临床异质性

本研究通过追踪一个携带新型COL6A2复合杂合突变（c.1514G>A/c.2877G>C）的家族，揭示了常染色体隐性Bethlem肌病（BM）的临床异质性。研究人员结合全外显子测序（WES）和皮肤成纤维细胞胶原VI免疫荧光分析，明确了COL6A2基因THD（Triple-helix domain）区突变导致微丝网络组装缺陷的分子机制，为COL6-RMs（胶原VI相关肌病）的精准诊断提供了范式。

　　

在神经肌肉疾病领域，胶原VI相关肌病（COL6-RMs）因其广泛的临床谱系而备受关注。从严重的Ullrich先天性肌营养不良（UCMD）到相对温和的Bethlem肌病（BM），这类疾病的诊断常因表型重叠和遗传异质性而充满挑战。尤其当患者缺乏典型症状如远端关节松弛或早期呼吸衰竭时，临床识别更为困难。近期发表在《Journal of Neurology》的研究，通过一个历经30年才确诊的家族病例，揭开了常染色体隐性BM的神秘面纱。

意大利的研究团队追踪了一个三代家族，其中三名姐妹表现出非典型肌病特征：儿童期起病的缓慢进展性肌无力，但缺乏COL6-RMs标志性的关节挛缩或呼吸功能障碍。传统检测手段如肌肉活检仅显示轻微肌纤维改变，而靶向基因panel也未能提供明确答案。这一困境最终通过全外显子测序（WES）技术突破——研究者发现患者携带COL6A2基因两个新型错义突变（c.1514G>A/c.2877G>C），分别位于编码胶原VI三螺旋结构域（THD）的505和959位点。

关键技术方法包括：1）对先证者及家系成员进行WES分析；2）利用患者皮肤成纤维细胞进行胶原VI分泌实验（经抗坏血酸诱导）；3）肌肉CT评估脂肪浸润模式；4）Walton Gardner-Medwin（WGM）量表量化功能损害。样本来源于意大利神经肌肉疾病生物库（Telethon Network成员）。

临床特征分析
三姐妹表现为下肢近端肌无力为主的运动障碍，发病年龄6-13岁，血清肌酸激酶（CK）正常或轻度升高。值得注意的是，她们均保持独立行走能力至50岁以上，且肺功能（FVC）未受损害。这种"温和表型"与既往报道的BM差异显著，尤其缺乏典型"由外向内"的肌肉脂肪化模式。

分子机制验证
免疫荧光实验显示先证者成纤维细胞完全缺失胞外胶原VI网络，而携带单个突变的母亲和健康兄弟则保留部分分泌功能。这证实了双等位基因突变通过破坏THD的甘氨酸重复序列（Gly-Xaa-Yaa），阻断胶原单体组装为微丝网络的病理机制。

诊断启示
研究强调：1）COL6A2隐性突变可导致无典型胶原病特征的BM；2）成纤维细胞胶原分泌实验在VUS（意义未明变异）解读中具有决定性价值；3）母亲合并重症肌无力的症状曾误导显性遗传假设，凸显家系分析的重要性。

这项研究拓展了对COL6-RMs疾病谱的认知，提示临床医生对非典型肌病应考虑隐性COL6A2突变可能。其创新性在于：首次报道c.2877G>C突变的功能性影响，并建立THD区双突变与温和表型的关联。未来研究需探索这些突变对胶原VI四聚体组装的精确干扰机制，为开发靶向治疗奠定基础。