泰国东京172-1型BCG疫苗替代ATP检测法在效价与稳定性放行标准建立中的应用研究

为解决BCG疫苗传统CFU法检测周期长、操作繁琐的问题，泰国研究人员通过开发ATP生物发光检测法，建立了东京172-1型BCG疫苗的效价与稳定性放行标准。研究验证了ATP法的准确性（91.73%）与重复性（%GCV≤7.74），实现了与CFU法的等效性（2×106 CFU/mL下限），为全球首个将ATP法纳入国家疫苗批签发的实践提供了科学依据。

　　

在全球结核病防控体系中，卡介苗（BCG）作为百年老药仍是儿童粟粒性结核的主要预防手段。然而，传统菌落形成单位（CFU）检测法因结核分枝杆菌生长缓慢（需1个月）、菌落聚集等技术瓶颈，严重制约疫苗批签发效率。更棘手的是，世界卫生组织（WHO）虽允许采用生物发光等替代方法，但不同BCG亚株（如东京172-1）的效价标准始终未能统一。这一困境直接威胁着疫苗质量控制的时效性与可靠性，尤其对泰国这样依赖本土化生产的发展中国家而言。

为此，泰国医学科学部的Supaporn Phumiamorn团队在《Biologicals》发表突破性研究。他们以泰国红十字会提供的东京172-1型BCG疫苗为样本，采用ATP生物发光检测技术（基于Dubos培养基培养、专用裂解缓冲液及商业化检测试剂盒），结合WHO参考品（NIBSC 07/272）和内部工作标准品（BCG220316）进行方法学验证。通过平行比较ATP法与CFU法在1/4~1/16梯度稀释下的检测一致性，最终建立适用于该亚型的效价放行标准。

研究结果
BCG substrain Tokyo 172-1 vaccine samples
研究采用泰国红十字会生产的冻干疫苗，2-8℃保存确保样本稳定性，为后续实验提供标准化材料基础。

Relationship between potency and dilution measured by ATP assay and CFU method
关键发现显示：在1/4稀释条件下，ATP法与CFU法测得效价均接近2×10⁶ CFU/mL下限，相对偏差<7%，证实两种方法在检测活菌量上的等效性。这一结果为替代方法的标准化应用提供了剂量依据。

Discussion
研究团队指出，ATP法的优势不仅在于将检测周期从30天缩短至48小时，其验证数据（准确度91.73%，重复性%GCV 7.74，再现性%GCV 5.57）更满足国际规范要求。值得注意的是，这是全球首次由国家药品检定机构（NCL）将ATP法纳入BCG疫苗常规批签发流程，为其他发展中国家树立了技术转化典范。

结论与意义
该研究通过系统验证ATP生物发光法在东京172-1亚型检测中的可靠性，成功建立了兼顾科学性与实操性的效价放行标准。这一创新不仅解决了传统CFU法的时效性缺陷，更通过技术本地化（如培养基优化、内标品制备）提升了泰国疫苗自主监管能力。其方法论框架对WHO修订BCG全球质控指南具有重要参考价值，尤其为同类型亚株（如丹麦1331、巴西Moreau）的快速检测提供了可借鉴的技术路径。